正交试验优化银杏胚愈伤组织继代培养及黄酮积累.pdfVIP

· 试验研究 · 北方 园艺2009(12)：34～37 正交试验优化银杏胚愈伤组织继代培养及黄酮积累 胡 燕 梅，张 治 华，周 骏 江，梅 双 喜，宋 鹏 飞 (武汉生物工程学院 生物T程系，湖北 武汉 430415) 摘 要：采用正交试验研究了基本培养基、NAA、6一BA、植酸(PA)4因素各3水平对银杏胚愈 伤组织继代培养及黄酮积累的影响，并测定了愈伤组织生长曲线。结果表明：银杏胚愈伤组织继 代培养的最佳组合是N。+NAA3．0mg／L+6一BA2．0rag／I+0．1 PA，各因子影响程度为基本 培养基NAA6一BA~PA；愈伤组织黄酮积累量最佳组合是 +NAA0．1mg／I+6-BA0．5 mg／L十0．05 PA，各 因子影响程度为NAAPA6一BA基本培养基。愈伤组织生长 曲线基本 呈 “S，’型，黄酮积累的适宜培养周期为 40~50d。 关键词：银杏；正交试验 ；愈伤组织；黄酮；植酸 中图分类号：S664．303．6 文献标识码：A 文章编号：1001--0009(2009)12一()(]34—04 银杏 (GinkgobilobaL)是国际上近代植物药研究 正交表选用 4因素 3水平的 (3) ，各因素的不 开发的热点之一 Ij。这主要源于其叶中含有较高含量 同水平见表 1。培养基为：试验号+3．O％蔗糖+0．7％ 的黄酮类天然药物。黄酮类物质可使冠状动脉扩张，降 琼脂，pH5．8，各试验号设计见表 2。 低血脂 ，增加脑血流量 ，对心脑血管循环有 明显的改善 表 1 I (3)正交试验因素和水平表 作用_3]。近年来，以银杏叶为原料加工提取黄酮的银杏 ％ble 1 1 (3)Factorsand1evels “ “ “ 产业在我国得到了迅速发展 。然而，大面积栽培银杏 树 占用了许多农作物耕地，同时银杏叶的生长及叶中黄 酮含量也会受到 自然环境的影响[5]。而利用植物细胞 培养生产药用成分是近年来发展起来的新领域，它已成 为开发药用植物资源的重要途径 。。]。为了获得生长快 速且生物量大的愈伤组织和积累最大量黄酮类物质，该 表 2 4因素 3水平 (3)正交设计 试验以银杏胚愈伤组织为材料 ，采用正交试验设计方法 rrable2 Fourfactorsandthreelevelsof1 (3) 研究愈伤组织继代培养和黄酮积累的影响因子，为银杏 愈伤组织后期的悬浮培养及工业化生产提供一定的技 1(O．5) l(O．05) 术参数。 2(1．0) 2(O．1) 1 材料与方法 3(2．0) 3(0．3) 1．1 试验材料 2(1．0) 3(0．3) 3(2．O) 1(0．05) 供试材料武汉生物工程学院植物细胞工程实验室 1(O．5) 2(0．1) 继代 3次以上 的银杏胚愈伤组织。培养方式为固体培