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维普资讯 技术与应用 生命科学仪器 2007第5卷 ／7月刊 荧光分光光度计的结构与应用 魏立娜 (东北农业大学理学院应用化学系，哈尔滨 150030) 摘要 荧光法因其具有灵敏度高，取样量少等特点，现已广泛应用于生化 、化学、药物分析 、食品检验、 地理、冶金、医学、环境科学和生命科学研究等各个领域。荧光分析法的发展与仪器应用的发展是密不可分的。本文介 绍了荧光分光光度计的结构、分类、应用。 关键词 荧光法，荧光分光光度计，结构，分类，应用 荧光法的固有灵敏度高，取样量少，检测限通常比 吸收光谱法低 1～3个数量级，可达ng．ml级；线性范 围也常大于吸收光谱，又有荧光寿命，荧光量子产率，激 狭缝 发峰波长，发射峰波长等多种参数因而有较好的选择 性[11。但也由于荧光法的高灵敏度，使得定量荧光法引 入严重的基体干扰，荧光法在定量分析的应用不如吸收 光谱法，因为吸收紫外可见光的物质种类要比吸收相应 区域辐射而产生荧光的物质多。目前荧光分析法广泛应 狭缝 用于生化、化学、药物分析、食品检验、地理、冶金、 I I l 医学、环境科学和生命科学研究等各个领域。 … … 一 荧光仪器是用来测定荧光物质的性质和含量的分 I I )——_-( 狭缝 狭缝 析仪器，通常分两大类：荧光光度计和荧光分光光度 光阱 计[21。荧光分光光度计技术在现代科学的发展中正显 (荧光分光光度计结构示意图 ) 示出独特的作用，越来越得到人们的重视。下面将对 荧光分光光度计的结构，分类，发展和应用作以简单 带。理想的单色器应在整个波长区内有相同的光子通 介绍。 过效率 ，不幸的是这种理想的单色器不存在。 1．3 检测器 1 荧光分光光度计的结构 一 般普通的荧光分光光度计均采用光电倍增管作 一 般荧光分光光度计由光源、激发光源、发射 为检测器。它是很好的电流源，在一定条件下其电流 光源 、试样池 、检测器 、显示装置等组成 。 量与入射光强度成正比。此外，还有光导摄像管、电 1．1 光源 子微分器 、电荷耦合器阵列检测器。 光源应具有强度大、适用波长范围宽两大特点，常 1．4 显示装置 用光源有高压汞灯、氙灯、氙一汞弧灯等。此外，紫外 以前，显示装置有数字电压表，记录仪和阴极示 激光器、固体激光器、高功率连续可调染料激光器和二 波器等，现在，人们可以通过计算机软硬件技术根据 极管激光器等荧光光源把荧光法的应用范围拓宽。 不同要求 ，来选择不同的直观的视频读出方式[3j。 1．2 滤光片和单色器 2 荧光分光光度计分类