拟南芥EARLI1基因在生物和非生物胁迫中抗性功能.pdfVIP

拟南芥EARLH基因在生物和非生物胁迫中的抗性功能 摘要 aluminium—induced rich 剧皿以(earlyArabidopsis genel)属于毋尸!R尸(hybridproline 类。PRP是五类细胞壁结构蛋白中的一类，它们在植物细胞生长和发育过程中决定特殊 的细胞壁结构，在植物受到物理伤害或病原体侵染时起防卫功能。本研究的目的在于通 过表达调控、生理生化分析及形态观察，研究EARLll在生物和非生物胁迫中的功能， 为阐明细胞壁蛋白在逆境条件下的作用机制提供证据。 本工作通过卡那霉素抗性筛选得到了EARLll过表达拟南芥转基因株系，采用 因植株中EARLH基因的表达量相对于野生型个体明显提高。同时，通过PCR技术筛选 86A06 打断。Northem印迹杂交结果显示SAILT-DNA纯合敲除突变体产生一条比野 以C01．0野生型拟南芥为材料分析各种胁迫因素对尉剧川基因表达的影响， 定程度上随NaCl浓度的提高而增加。比较过表达、敲除突变体及野生型拟南芥在不同 浓度NaCl和甘露醇胁迫下的表型特征和生理指标，结果表明在一定程度上，过表达植 株表现出更强的耐盐和耐旱性，而敲除突变体对盐和干旱的耐受能力与野生型个体相比 明显下降。 cinereaPers．ex Northem印迹杂交结果显示蒜薹灰霉菌(Botrytisofgalicsprouts)接 种处理可以诱导拟南芥EARLll基因的表达。采用台酚蓝染色观察真菌侵染状况，发现蒜 薹灰霉菌对过表达植株叶片的侵染程度比野生型个体叶片要轻，而敲除突变体植株叶片 被侵染的程度较为严重。转EARLll基因酵母在半乳糖诱导后与转空载体酵母相比生长速 度明显下降，进一步说明EARLll基因具有抗真菌的功能。表型及扫描电镜观察表明敲除 突变体叶片更易被昆虫啃食。 及Northern印迹杂交技术对具有卡那霉素抗性的再生植株进行了鉴定，并以转基因烟草 为材料进一步验证了EARLH的耐盐性。 关键词 HyPRP，删魁仃，过表达，T-DNA敲除突变体，Northern印迹杂交 Ⅱ Resistance EARLHto GeneAbioticandBioticStresses ofArabidopsis Abstract aluminium—inducedto EARLH(earlyArabidopsis genel)belongsHyPRP(hybridproline rich makesasubclassof rich is protein)genefamily．HyPRPup PRP(proline existedin oneoffive ofstructuralcellwall widely higherplants．PRPrepresents types that functionbothindeterminationof structureofcellwall proteinsmay specific duringplant andindefenseof and infection．The development plantsagainstphysical