2013精品学案5酵母细胞的固定化技术.docVIP

课题5：酵母细胞的固定化技术 【高考要求】酵母细胞的固定化（B级） 【导学过程】（一）、固定化酶技术： ①优点：酶既能与反应物接触，也易分离。能被反复利用。 ②主要方法： 、 和化学结合法（交联法）。 ③固定化酶的应用实例：（1）生产新型青霉素；（2）高果糖浆生产（见课本） （二）、固定化细胞技术：固定化细胞方法与固定化酶基本相同。 优点：成本低，操作更容易（酶由细胞合成）；一系列的酶促反应；对酶活性影响小。 一般来说，酶更适合采用 和 法固定，而细胞多采用 法固定化。这是因为细胞个大，而酶分子很小；个大的难以被 吸附 或 结合 ，而个小的酶容易从 包埋材料 中漏出。 常用的载体有 、 、 、 和 等。 〖思考1〗对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么？ （三）、实验操作： (1)制备固定化酵母细胞：需要的材料是 、 和 。 1.酵母菌的活化： 活化就是处于休眠 状态的微生物重新恢复正常的生活状态。 2.配制物质的量尝识为0.05mol/L的Cacl2溶液（作用：使胶体聚沉，形成凝胶珠） 3.配制海藻酸钠溶液：注意①浓度适宜，保证凝胶珠成型且能固定；②加热时要注意：小火，或者间断加热。边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状。 4.海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合：（注意）融化的海藻酸钠要冷却致室温，才可加酵母细胞。 5.固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 CaCl2 溶液中，并浸泡。 (2)用固定化酵母细胞发酵 1.将固定好的酵母细胞用 蒸馏水 冲洗2-3次。（为什么？） 2.将固定好的酵母细胞加入到装有麦芽汁（或葡萄糖溶液）的瓶中发酵，温度为 。 〖思考2〗加热溶化海藻酸钠时微火加热并不断搅拌的目的是什么？ 〖思考3〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞？ 〖思考4〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？ 〖思考5〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作吗？ （四）、结果分析与评价 （1）观察凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝识。 （2）观察发酵的葡萄糖溶液：发酵产生酒精，可以看到产生了很多 ，同时会闻到 。 【达标检测】1、下列对固定化酶和固定化细胞的说法错误的是 A、固定化酶和固定化细胞是利用物理或者化学方法将酶或者细胞固定在一定空间内的技术 B、固定化酶和固定化细胞技术包括包埋法、化学结合法和物理吸附法 C、一般来说，酶更适合采用包埋法固定化，而细胞多采用化学结合和物理吸附法固定化 D、包埋法常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等 2．海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要通过加热促进其溶解，采用的最好的加热方法是 A．快速加热 B．持续高温加热 C．小火间断加热 D．灼烧加热 3．高果糖浆生产需要的酶是 A．葡萄糖异构酶 B．蔗糖酶 C．麦芽糖酶 D．果糖酶 4．研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将大肠杆菌得到的三酯磷酸酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，于微生物降解相比，其作用不需要适宜的 A．温度 B．酸碱度 C．水分 D．营养 5．将酵母菌的培养液由富氧状态变为缺氧状态，下面加快的一项是 A．CO2的释放 B．丙酮酸的氧化 C．葡萄糖的利用 D．ATP的形成 6．下列不是用于包埋法固定化细胞的载体是 A．琼脂糖 B．醋酸纤维素 C．聚丙烯酰胺 D．聚乙烯树脂 7、试分析下图中，