二黄方对EAE大鼠急性期血浆MCP-1、TNF-α水平的影响.pdfVIP

中医药 20o9年 3月 第 28卷 第 3期 BeiiimzJournalofTraditionalChineseMedicine．March。2o0I9．V01．28，N 二黄方对EAE大鼠急性期血浆 MCP一1,TNF—Ot水平的影响木 樊永平 周 莉 王 蕾 ： 龚海洋 叶 明 【摘要】 目的 探讨二黄方对实验性 自身免疫性脑脊髓炎(Experimentalautoimmuneencephalomyeliti8，EAE)大鼠急性期血 浆单核细胞趋化因子一l(MCP一1)、血浆肿瘤坏死因子一c~(TNF-a)的影响。方法 用 MBP免疫 Lewis大鼠诱导EAE模型，随机分 为模型组、激素组、中药组及空白组 。分别在造模后第 7天、14天采集血样 ，检测血浆 MCP一1、TNF一旺水平 。结果 模型组血浆 MCP_1、TNF—Ot水平在免疫后第 7天升高，免疫后第 14天达高峰，显著高于正常组 (P0．01)；造模后第 14天，激素组血浆 MCP一1、TNF—Or．水平低于模型组(PO．05)；造模后第 14天，中药组血浆 TNF-Ⅸ水平低于模型组和激素组 (P0．05)。结论 二黄 方可减轻 EAE疾病严重程度 ．可能通过下调急性期血浆 TNF一 水平发挥治疗 EAE的作用。 【关键词】自身免疫性疾病，实验性 自身免疫性脑脊髓炎，肿瘤坏死因子一 ，单核细胞趋化因子一1，中医药，二黄方 实验性 自身免疫性脑脊髓炎 (experimentalau— 物生产许可证号 ：SCXK(京)2007—0001】，饲养于首 toimmuneencephalomyelitis，EAE)是一种研究多发 都医科大学实验动物中心国家标准实验室[SPF级 。 性硬化 (MuhipleSclerosis，MS)免疫细胞介导 的局 许可证号：SYXK(京)2500—0022]。随机分为正常空 限于中枢神经系统内的迟发性超敏反应型 自身免 白组、模型组、激素组、中药组 。每组 18只。 疫疾病 的经典模型 。MS的发病与免疫功能紊乱密 1．1．2 药物 ：二黄汤主要 由生地 、熟地 、水蛭 、浙 贝 切相关 ，在MS的病理过程 中，激活的T淋 巴细胞 母、全蝎、连翘、天麻、益母草、白花蛇舌草等组成。所 进入 中枢神经系统 ，激活致炎细胞 因子级联反应 ． 有药物购 自北京同仁堂药店 ，由该店煎药机煎煮 。浓 最终导致脱髓鞘 、神经胶质瘢痕和轴索损伤 。其 缩成 0．7gCmL的药液，袋装密封 ，4cI=冰箱保存 。醋酸 中。细胞 因子和趋化 因子在 MS的发病机制 中起 了 泼尼松片 ，50ms／片 ，由天津力生制药厂提供 ，批号 重要的作用 【一。我们的前期研究发现 3【]．中药二黄 060802。 方具有补肾填精 、化痰活血之功效 。在临床常规激 1．1．3 试剂 ：完全福 氏佐剂 (CFA)，由美 国Sigma公 素治疗的同时及早加上 中药治疗 ．可 明显改善症 司提供 ，批号F7881；髓鞘碱性蛋 白M『BP87—99(hu— 状 ，减少复发及减轻激素及免疫抑制剂的毒副作 man，bovine，rat)1，由美 国ALEXIS生物化学公司提 用 。本研究以EAE大 鼠为 MS动物模型，研究二黄 供 ，批号 16752／a。 方 对 EAE大 鼠血 浆 肿 瘤 坏 死 因子 一仪(Tumor 1．1．3 血浆细胞 因子检测 ：大 鼠细胞 因子 6plex NecrosisFactor—Ot，TNF一仅)及单核细胞趋化 因子一1 flowc~OrlTl(IFN一^y、IL一4)试剂盒 ，由美 国Bender (MonocyteChemoattraetantProtein一1。MCP一1)的影 Medsystems公司提供 ，批号根据试剂盒 响，探讨补肾化痰活血法治疗 EAE的机制 。 说明书，采用流式细胞仪 美【国BD公司，Cytometric 1材料与方法