实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳.docVIP

实验一 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 [实验目的] （1）了解电泳的一般原理、撑握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术。 （2）测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。 [实验原理] 带电荷的胶体粒子在电场中移动的现象称为电泳。醋酸纤维素薄膜电泳法是以醋酸纤维素薄膜作为支持物。 血清中含多种蛋白质，当在pH这8.6时，这些蛋白质均带负电，它们在电场中向阳极移动，由于各种蛋白质所带负电荷多少及颗粒大少不同，所以在同一电场，同一pH环境中泳动速度不同。 本实验以醋酸纤维素为电泳支持物，分离各种血清蛋白。血清中含有清蛋白，α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于氢基酸组分、立体构象、分子量、等电点及形状不同（表17.1），在电场中迁移速度不同。分子量小、等电点低、在相同碱性pH缓冲体系中、带负电荷表2 人血清中12种蛋白质的等电点及分子量 蛋白质名称 等电点（pI） 分 子 量 清蛋白 α-球蛋白 β-球蛋白 γ-球蛋白 4.88 5.06 5.12 6.85-7.50 69000 α1—200000 α2——300000 90000—150000 156000—300000 多的蛋白质颗粒在电场中迁移速度快。例如，以醋酸纤维素薄膜为支持物，正常人血清中pH8.6的缓冲体系中电泳1h左右，染色后可显示5条区带。清蛋白泳动最快，其余依次为α1-，α2-，β-及γ-球蛋白（