RNA干扰研究.pptVIP

2006年10月2日,瑞典皇家科学院诺贝尔奖委员会宣布，将2006年度诺贝尔生理学或医学奖授予两名美国科学家安德鲁·法尔(Andrew Fire)和克瑞格·梅洛(Craig Mello),以表彰他们发现了RNA干扰现象。 “他们的发现能解释许多令人困惑、相互矛盾的实验观察结果，并揭示了控制遗传信息流动的自然机制。这开启了一个新的研究领域。” —诺贝尔奖评审委员会 1990年，植物学家Rich Jorgensen给粉色矮牵牛花注入了CHS的基因，结果没看到期待中的深紫色花朵，多数花成了花斑的甚至白的！ 定义 RNAi（RNA interference）是指在生物体细胞内，dsRNA引起同源mRNA的特异性降解，因而抑制相应基因表达的过程。 特点 高专一性 高效性 RDRP RNA依赖性的RNA聚合酶 (RNA dependent RNA Polymerase, RdRp) 所有RNA病毒均编码RdRp, RdRp参与基因组的复制,mRNA的合成以及其他的一些重要的生物学过程。 在拟南芥、线虫、脉孢菌和裂殖酵母中存在番茄RdRp的同源基因,这些基因均与RNAi有关。 法尔和梅洛的研究让人们认识到，RNA作用不可小视，它可以使特定的基因开启或关闭，活化或抑制，是一种重要的基因调控机制，并且揭示出一个隐匿DNA和蛋白质后面的庞大而复杂的RNA世界。 SiRNA与MiRNA * * * RNA干扰的研究 报告人：微生物研究所 2006年诺贝尔生理学或医学奖 Contents RNAi现象是如何发现？ 1 什么是RNAi？ 2 SiRNA与MiRNA 3 结束语 4 Andrew Z. Fire Craig C. Mello 　野生型　 　 　　　试验 预测 Rich Jorgensen的实验 Su Guo的实验 线虫（C. elegans) Down 线虫（C. elegans) Par-1 Gene Disruption Expression Antisense RNA + Sense RNA + Par-1 Gene Disruption Expression Down RNAi现象的发现 线虫（C. elegans) (Fire, 1998) + Par-1 Gene Disruption Expression Down Double Strand RNA This effect was later explained by Dr. Andrew Fire Dr. Craig Mello in 1998, by the presence in the antisense RNA preparation of very small amounts of the corresponding antisense strand. The presence of dsRNA duplex led to what we now recognize as an RNAi effect. Neg. control Uninjected Antisense RNA dsRNA Mex-3 mRNA detection in embryos by in situ hybridization Figure 1. Effects of mex-3 RNA interference on levels of the endogenous mRNA. (A) Negative control showing lack of staining in the absence of the hybridization probe. (B) Embryo from uninjected parent showing normal pattern of endogenous mex-3 RNA (purple staining). (C) Embryo from parent injected with purified mex-3 antisense RNA. These embryos retain mex-3 mRNA, although levels may be somewhat less than wild type. (D) Embryo from a parent injected with dsRNA corresponding to mex-3 ; no mex-3 RN