极端嗜热菌海栖热袍菌α-葡萄糖醛酸酶高效表达和重组酶纯化.pdfVIP

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2017-09-01 发布于安徽
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极端嗜热菌海栖热袍菌α-葡萄糖醛酸酶高效表达和重组酶纯化.pdf

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卷期生物工程学报 ! # %’ (! ) (# 年月 !# $ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+’, !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 极端嗜热菌海栖热袍菌葡萄糖醛酸酶的高效表达和重组酶的纯化 ! ! ，， / ! / / ! 薛业敏毛忠贵邵蔚蓝 / （江南大学工业生物技术教育部重点实验室，无锡!/#-4 ） ! （南京师范大学微生物工程重点实验室，南京!/5$ ）摘要葡萄糖醛酸酶作为木聚糖降解的限速酶之一，在木聚糖类半纤维素的生物转化中起着重要的作用。海 . ! 栖热袍菌 3%*4(/(1+ 4+*#/#4+ 是一个嗜极端高温的厌氧细菌，其产生的极耐热性酶类具有非常可观的工业应用前景。但热袍菌属的基因在大肠杆菌中的表达一般较困难。研究了中的极耐热性葡萄糖 3%*4(/(1+ 3 ( 4+*#/#4+ . ! 醛酸酶基因在大肠杆菌不同菌株中的表达水平及纯化技术。结果表明，稀有密码子、和限制了该基 FGF FGG FHF 因在大肠杆菌中的表达，在大肠杆菌（）可得到高效表达，重组蛋白表达量达，比酶活比 IJ!/.KLCM’+= N9- .OPJ ! Q 野生菌株提高倍；重组蛋白经热处理和金属 ! R 的亲和层析提纯后，达到了电泳纯，提纯倍数为倍，收率为 1 ); 1 S / 。对重组菌诱导表达条件的研究表明，营养丰富的培养基有助于重组菌的生长，重组菌生长至为 11 S /Q 2I 564 时添加诱导后重组蛋白的表达量最高。 S$ T S0 PM2G 1 关键词海栖热袍菌，葡萄糖醛酸酶，高效表达，重组酶纯化，酶学性质 . ! 中图分类号文献标识码文章编号（） U0/#