加味香连丸定性鉴别及黄连生物碱含量测定.pptVIP

加味香连丸的定性鉴别及 黄连生物碱的含量测定 一、仪器与药品 1）层析缸 2）三用紫外分析仪 3）喷雾瓶 4）吹风机 5）紫外分光光度计 6）小层析柱：高13cm,内径8mm，2个 7）中性Al2O3(150—200目) 8）滴管 9）加味香连丸样品 10）盐酸小檗碱对照品、黄连、木香对照药材 11）95%乙醇 1、定量用样品的净化 1）定容：将索氏提取样品定容到25mL。 2）净化 A、装柱：取2个高13cm、内径8mm的Al2O3柱，平行装柱。分别垫上少许棉花，装入中性氧化铝，高度1.5cm左右。1个作空白，另1个加入样品。 B、加样与洗脱：将两根小柱下分别接上10mL容量瓶，样品用小柱中精密加入样品液0.5mL，待样品完全被填料吸收后，加入95%EtOH至洗脱完全。空白用小柱中的填料直接用95%乙醇平行洗脱。接近10mL时停止洗脱，分别定容到10mL。 C、含量测定：采用外标一点法于350nm 测定含量 供试品紫外测定：空白采用自制空白 对照品紫外测定：空白采用95%乙醇，对照品浓度：0.06mg/mL D、计算（100g干品中含有多少克总生物碱） 二、实验步骤 A供/A标 = C供/C标 约0.1g 25mL 0.5mL 10mL 含量(%) = C供×D m × 100% 1、加味香连丸中黄连和木香的薄层鉴别 1）黄连的鉴别 取本品60mg，研细，加乙醇5ml，置水浴中加热回流15分钟，滤过，滤液补加乙醇使成5ml，作为供试品溶液。另取黄连对照药材50mg，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每1ml含0.04mg的溶液。用点样用毛细管分别取1.5cm左右，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯：氯仿：甲醇：氨水：二乙胺（8：2：2：1：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个黄色荧光斑点。 二、实验步骤 O O O O O O O O × × × 小 檗 碱 样 品 黄连 对照 药材 例 1.5cm 圆形 点样 饱和 10min 1、加味香连丸中黄连和木香的薄层鉴别 2）木香的鉴别 取本品0.5g，研细，加乙醚5ml，放置2小时，时时振摇，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.2g，加乙醚5ml，同法制成对照药材溶液，用点样用毛细管分别取1.5cm左右，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷：丙酮（10：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色至蓝紫色斑点。 二、实验步骤 O O O O O O × × 加味香连丸针对木香提取液 木香 对照 药材 例 光度计模式操作教程 开机自检通过后，经过15分钟的预热，系统自动进入主菜单。 波长：546.0nm 09：21：19 取消 下翻 选取 D2 W 系统主菜单 ①光度计模式 ②定量测量 ③光谱扫描 ④动力学测量 ⑤DNA/蛋白质测量 测试波长 当前时间 氘灯点亮显示 钨灯点亮显示 波长：546.0nm 09:21:19 取消 下翻 选取 D2 W 系统主菜单 ①光度计模式 ②定量测量 ③光谱扫描 ④动力学测量 ⑤DNA/蛋白质测量 点击“选取”功能键，或点 ，进入光度计模式。 ENTER 波长：546.0nm I: 19669 09:21:19 设置单位 模式 因子 标样测量 D2 W 0. 0 0 0 A b s 首先选择测量所需要的波长。 点 进入。 GOTOλ 波长：546.0nm I: 19669 09:21:19 D2 W 0. 0 0 0 A b s 请输入波长：546.0_ 使用数字键和小数点输入所需要的波长。 波长：546.0nm I: 19669 09：21：19 D