甲醇蛋白 蛋氨酸 肌苷酸 左旋肉碱 介绍 生产工艺课件.pptVIP

酶法测定评价 优点 灵敏度高 重复性好 回收率较好 CAT作用专一，排除了D-肉碱的干扰 缺点 DTNB会很缓慢的抑制CAT的活性 3.色谱法 主要是HPLC和GC，前者运用较多。运用紫外检测器检测将其与类似物分开进行定量。此法特异性高，但灵敏度低。 4.光谱法 质谱技术 放射酶学 对乙酰辅酶A进行14C标记，反应后分离检测，灵敏度达到皮摩尔水平。 肌苷酸 一、产品介绍 1、结构与性质 肌苷酸又名次黄嘌呤核苷酸或次黄苷酸，英文简称IMP，分子式为C10H13N408P。 白色细结晶，味鲜，无臭。 不吸湿，易溶于水，在乙醇或者其他有机溶剂中溶解度极小。 结晶状态的IMP稳定性较好。 在水溶液和碱溶液中也稳定，但在酸性(pH小于4)溶液中稳定性较差。 2、生物体内合成途径 原料： 天冬氨酸 甘氨酸 CO2 谷氨酰胺 一碳单位 5-磷酸核糖 3、应用：主要用作各种调味食品的助鲜剂。 二、生产方法 1、一步发酵法（直接发酵法） 原理：挑选以腺嘌呤缺陷型为主要遗传标记的变异菌株，配以最佳发酵条件，在培养液中直接积累肌苷酸。 常用菌：产氨短杆菌、谷氨酸棒杆菌、短小芽孢杆菌 2、两步发酵法（分段合成法） 在发酵过程中添加次黄嘌呤，由微生物产生的胞外酶催化生成肌苷酸。 斜面培养 种子培养 发酵培养 次黄嘌呤 肌苷酸 催化 三、提取工艺 1、树脂提取法 发酵液 清液 酸化液 流出液用NaOH调pH9.5 洗脱液 浓缩液 肌苷酸粗结晶 肌苷酸精品 放冷库结晶 压滤除菌体 Hcl调pH1.5 阳离子树脂 阴离子树脂、水洗、Hcl 加Nacl洗脱 减压浓缩 加两倍乙醇 水溶解 加乙醇 过滤烘干 2、活性炭提取法 发酵液 pH2.5酸化液 过滤压滤液 加热 缓慢加盐酸 加1.5%活性白土 流经酚醛氢型树脂 脱色液 加粉末活性碳3% 80-90℃热水洗 0.1mol/lNaOH洗脱 洗脱液 Hcl调pH7-8 中性肌苷酸溶液 减压浓缩 含肌苷酸8%左右 过滤 滤液 酸化 酚醛树脂脱色 脱色液 碱液中和 pH7.0肌苷酸溶液 加1-2倍体积乙醇 肌苷酸粗结晶 水溶解 加乙醇 放冷库结晶 过滤烘干 精产品 四、检测方法 薄层层析 高压电泳+紫外分光光度法 高相液相色谱法 高压电泳+紫外分光光度法 原理 针对物质在一定的pH溶液中电离程度的不同，因所带的电荷不同，在高压电场作用下，各种物质移动的速率不同，因而体现在滤纸不同区域而加以分离。 肌苷酸含有五元的杂环，在波长250 -260nm处有最大的吸收峰。 高相液相色谱法 是目前较常用的检测肌苷酸的方法。 缺点 相对标准偏差和回收率差异较大 操作严格 花费较多 耗时多，复杂 五、研究前景 1、遗传育种方面 当前国内对肌肉中肌苷酸的研究报道，较多的是在生理、病理、免疫、神经领域。 研究肌苷酸的沉积规律，并从遗传育种和饲养管理方面改善肌苷酸的沉积，从而改善肉的品质，这是动物学家们的努力方向。 2、食品加工方面 对于加工方面影响肌苷酸含量的因素的研究，国内还未从正规刊物上见报道。 对于加工方法、包装方法以及贮藏方法和食品中其他物质的存在对肌苷酸含量的影响，这需要食品科研工作者进一步深入研究，以揭示其规律，改善食品的风味。 3、评价新鲜度方面 用肌苷酸来评价肉的新鲜度，是肌苷酸研究的一个方向。 这一方面的研究国外比较深入，现在国内此方面的报道很少。 李燕等曾用肌苷酸和肌苷来评价虾的新鲜程度。 王胜利等探索了腺苷酸含量与硫化氢和细菌总量的关系。 * 赫斯特-伍德法 * 两种会竞争性地抑制肉碱乙酞转移酶 ( C A T )和肉碱脂肪酞转移酶 ( P T C )的活性，阻碍细胞的脂肪代谢。 两种会竞争性地抑制肉碱乙酞转移酶 ( C A T )和肉碱脂肪酞转移酶 ( P T C )的活性，阻碍细胞的脂肪代谢。 两种会竞争性地抑制肉碱乙酞转移酶 ( C A T )和肉碱脂肪酞转移酶 ( P T C )的活性，阻碍细胞的脂肪代谢。 混合培养发酵苹果酸进程 FU：富马酸 LMA：L-苹果酸 RG：残糖 优势： L-苹果酸的转化率高 缺点： 培养条件要求比较严格 发酵周期较长 产酸率相对较低 副产物较多 5.固定化酶或细胞转化法 利用具有高活性富马酸酶的微生物细胞或富马酸酶，采用固定化酶或细胞反应器，将富马酸转化成L-苹果酸 微生物：短杆菌、产氨短杆菌、黄气短杆菌、 解脂假丝酵母及温特曲霉等 载体：藻酸钙凝胶、角叉菜胶及聚丙烯酰胺凝胶等 生产过程 一是固定化细胞的制备：将产酶菌株培养成熟后，收集菌体细胞，包埋菌体，制备固定化酶或细胞。 二是L-苹果酸制备：先将富马酸和CaCO3 反应转化成为富马酸钙，再经转化柱作