鸡传染性法氏囊病毒河南H-1株VP2基因的克隆及原核表达.pdfVIP

摘要 鸡传染性法氏囊病(InfectiousBursal 的鸡的一种高度接触性传染病。1BDV的靶细胞是未成熟的B淋巴细胞或B前淋巴细胞，感染后很 快发生变性和坏死。由于法氏囊是B细胞成熟的重要器官，鸡在感染IBDV后，淋巴滤泡内的B细 咆大量裂解死亡，网状细胞呈凋亡过程，虽终导致法氏囊等器官萎缩而引起免疫抑制，结果可使鸡 群对其它疾病易感性增加，对疫曲(如新城疫、禽流感等)接种的免疫应答能力也下降，对养鸡业造 成严重的经济损失。 VP2是病毒的重要结构蛋白，含有血清型特异的能诱导中和抗体的抗原决定簇，是病毒主要的 宿主保护rl生免疫原。本试验应用RT-PCR技术，将从河南某鸡场分离并鉴定的传染性法式囊病毒 分离株——IBDvH．1株，进行病毒VP2基因的克隆与表达。首先提取病毒总RNA，然后进行反 建了pTVP2重组质粒。序列分析表明，该VP2基因及推导氨基酸序列与日本和欧洲超强毒株序 列有较高的同源性，特征性氨基酸变异相似，提示H．1毒株可能为超强毒株。进化分析也表明 卜I．1毒株与欧洲超强毒株UK661和日本超强毒株OKYM位于同一进化分支，提示H．1株病毒可 能为超强毒株。 Kd的VP2蛋白。表达蛋白以 构建了VP2基因原核表达载体pETVP2。经IPTG诱导表达了53．7 包涵体形式存在于宿主菌中，能够与鸡IBDV抗血清特异性反应。本试验为进一步研究VP2蛋白 的功能和研发相应的诊断技术奠定了基础。 关键词：鸡：传染性法氏囊病病毒；VP2基因 Abstract Infectiousbursal a infectiousdiseasecausedinfectiousbursal disease(IBD)ishightangent by of disease cellsorimmature IBDV、often B-lymphoidcells，thetarget virus(IBDV)．Pre·B·lymphoid andnecrosis．SincethebursaofFabficiusis tothematurationof appeardegeneration importantorgan cellsin bursaFabricius of mountofB the follicleof is cells，a lytic，atrophy B—lymphoid lymphoid bursa toincreased toother anddecreased causingimmunosuppression，leadingsusceptibilitypathogens and to castlediseaseavian considerable immunologicalresponsevaccine(new influenza)，producing economiclossin industries． poultry the and VP2 is mainstructure of theBce