雌激素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响及对内皮型一氧化氮酶表达的影响.pdfVIP

中文摘要 雌激素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响 及对内皮型一氧化氮酶的影响 摘 要 ●． 肾缺血再灌注损伤是肾脏移植中不可避免的病理生理 过程。同时在临床上，如急性缺血性肾功衰竭、心肺复苏、 心脏体外循环、失血性休克、需暂时阻断l肾血流的手术等， 均可导致肾缺血再灌注损伤。急性缺血所引起的急性肾小管 坏死(acutetubulenecrosis nephric ATN)是急性肾功能衰竭 (acuterenalfailure ARF)常见类型，在其他原因引起的ARF 中，肾脏缺血／再灌注(I瓜)损伤也起重要作用。一般认为， 任何原因引起的急性肾衰都在不同程度上存在着肾血流灌 注量减少和肾血管尤其是肾小球前血管收缩加强。肾脏缺血 最根本的治疗措施就是恢复血供，但血供重建将引起组织的 进一步损伤。有研究表明与肝脏、心、脑缺血／再灌注损伤密 切相关的有超氧化物歧化酶fSOD)、脂质过氧化酶、内皮素 一1、一氧化氮(NO)等物质，雌激素通过调节这些物质对 IRI)产生保护 缺血再灌注损伤(ischaemia／reperfusioninjury nitricoxide 作用。内皮型一氧化氮酶(endothelialsynthase eNOS)在肾中含量较高，主要存在于肾血管内皮细胞，许 ，乳． 多物质和生理／病理刺激可调节eNOS的表达，增加NO的合成 和释放。从而减轻I／R损伤。本实验利用免疫组化探讨苯甲 酸雌二醇对肾缺血．再灌注损伤(renal RIRI)的保护作用及鼬Rj后eNOS的表达。 injury 目的探讨雌激素对大鼠肾缺血再灌注损伤中内皮型一 中文摘要 目的探讨雌激素对大鼠肾缺血再灌注损伤中内皮型一 氧化氮酶的表达及对SOD活性的保护作用。为临床治疗肾 脏缺血再灌注损伤提供实验依据和理论指导。 300—3509，随机将75只SD大鼠分为假手术组f A组n=25)、 B两组在术前3天每天腹腔注射生理盐水2ml，C组在术前 3天每天腹腔注射40mg／kg／d。将大鼠以0．4％氯胺酮100mg ／kg腹腔内注射麻醉后，沿腹部正中切口进腹，小心分离双 侧肾蒂，B组和C组大鼠无损伤动脉夹阻断双侧肾蒂，造成 双肾缺血，45分钟后松开动脉夹，实行再灌注。缝合切口， 自由摄食，自然光照。于再灌注24h活体摘取左。肾，左。肾背 面下半部，称0．2克湿组织放入玻璃匀浆器中，加入0．05mol／L 磷酸缓冲液(含0．1mmol／LEDTA，PH7．8)，冰浴中制成10％ 的组织匀浆。切取再灌注24h大鼠左肾的】／3，固定于2．5％戊 二醛磷酸缓冲液中，行透射电镜检查。剩余部分福尔马林固 定，常规石蜡切片，以备常规染色和免疫组化用。心脏取血 3ml，备血肾功能检查。假手术组以相同手术方法暴露双侧 肾脏并分离肾周组织，不夹闭双侧肾蒂，其处理与缺血再灌 注组相同。用酶法测再灌注后24h血BUN，Cr；福尔马林液 固定左肾组织，常规石蜡切片，作HE染色，在HB．2型 分；测定。肾组织SOD活性；采用免疫组织化学SABC法， 测定肾细胞胞浆内eNOS的表达，凡胞浆中有黄褐色颗粒者 为阳性细胞。采用MIAS一图像分析系统作NOS蛋白定量分 析；2．5％戊二醛磷酸缓冲液固定左肾组织，按透射电镜标本 中文摘要 合、切片、染色等步骤，在日