氯美噻唑对大鼠脑出血周边组织谷氨酸、一氧化氮含量及细胞凋亡的影响.pdfVIP

HEILONGJIANG MEDICINEANDPHARMACY Jun．2009，Vo1．32No．3 ·19 · 氯美噻唑对大鼠脑出血周边组织谷氨酸、 一 氧化氮含量及细胞凋亡的影响 韩 凤 ，杨 慧 ，侯丽淳 ，‘赵锦程。 (1．佳木斯大学附属第一医院神经二科 ，黑龙江 佳木斯 154003；2．佳木斯大学科技处．黑龙江 佳木斯 154007) 关键词 ：脑 出血 ；7一氨基丁酸 ；谷氨酸 ；细胞 凋亡；氯 美噻唑 中图分类号：R743．34 文献标识码 ：A 文章编号：1OO8～O104(2009)03—0019—01 脑 出血是指原发性非外伤性脑实质 内出血，近年来研究 2 结果 证实．脑 出血周边组织存在神经细胞凋亡且存在长时间凋 2．1 脑 出血周边组织Glu、NO含量的变化 亡，谷氨酸、一氧化氮与脑 出血周边组织细胞凋亡的关系．特 脑 出血后4h起 ，出血周边脑组织谷氨酸含量 明显增高 别是氯美噻唑对脑出血保护作用研究尚有待深入 。因此 ，本 ( 0．O1)，12h达高峰 ，持续至7d(P 0．05)．治疗组谷 研究采用分组，药物干预及多时间点检测生理指标来探索氯 氨酸水平4h起也明显提高 ( 0．01)，12h达高峰．至72h 美噻唑对脑 出血周边组织 Glu、NO含量及神经细胞凋亡变 起恢复正常 (P 0．05)．治疗组4h、6h、12h、24h、72h谷氨 化规律及氯美噻唑对脑 出血周边组织上述指标的影响 ．为氯 酸水平明显低于脑 出血组 (P 0．01)。见表1。 美噻唑对脑出血的治疗提供实验依据 。 表1 I1~lit血后不同时间点Glu含量的变化(umol／g, 士 ；n=8) l 材料与方法 1．1 材料 Wistar大 鼠112只，体重200～250(221士7．9)g，雌雄不 限，动物随机分为脑 出血组、脑 出血+氯美噻唑干预组各56 只，两组分别分为 出血前 (假手术组)、出血后4h、6h、12h、 24h、72h、7d每时间点各8只。 1．2 方法 Po．05vs脑 出血前 ； 0．O1vs脑出血前；P0．05v 1．2．1 模型的制备 脑 出血对应时问点 ； 中 0．O1vs脑出血对应时问点 。 采用立体定 向 自体血脑 内注入法 。参照牛 国忠n报道的 脑 出血后4h起 ，出血周边脑组织 NO含量 明显增高 方法及 DeinsbergerW 等 2【的方法改进。脑 出血前组 只进针 ( 0．O1)，72h达高峰 ．持续至7d(P0．01)．治疗组 N0 不注血 。脑 出血加氯美 噻唑干预组与脑 出血组前述操作相 水平 12h起也明显提高 (’ 0．01)，72h达高峰．治疗组4h、 同，并于术后即刻、1h、3h、24h、48t,、72h分别腹腔注射氯美 6h、12h、24h、72h、7d NO 水 平 明显 低 于 脑 出血 组 噻唑30mg／kg，脑 出血组、出血前组注射等量生理盐水 。实验 ( 0．05，P 0．01)。见表2。 操作过程大 鼠的体温在恒温垫的调节下维持在37．5C左右 。 表2 脑出血后不同时间点NO含量的变化(um0I／gprot；；士s，；n=8) 大 鼠清醒后无偏瘫体征。或血肿沿针道反流 ．或进入脑室者 弃用。 1．2．2 检测方 法 1．2．2．1 Glu含量检测 各组各 时间点 由乙醚麻醉大 鼠，断头处死 ，冰盘上切取 血肿周边脑组织约6o～120rag，加入20倍体积生化检测 的冰 冷离心缓冲液 。冰浴下手动匀浆2O次 ，4C600g离心5min，取 Po．05vs脑 出血前 ； 0．01vs脑出血前 P 0．05v 上清液在冰浴 中电动匀浆10min．4CJ500g离心lOmln，取上 脑 出姐对应时间点； 0．01vs