海藻糖合酶基因工程菌的高密度发酵策略.pdfVIP

科学研究 食品研究与开发 第203009卷年第66月期 73 海藻糖合酶基因工程菌的高密度发酵策略 陈颖 ’，张峻 ，，李明春z，齐欣，。唐柳 ， (1．天津市林业果树研究所，天津 300112；2．南开大学 生命科学院，天津 300071) 摘 要：探讨海藻糖合酶基因工程茵高密度发酵过程中的一些影响因素，为海藻糖合酶基 因工程菌实现工业化生产 提供理论依据。 关键词：海藻糖合酶；基因工程茵；高密度发酵 S’I’ttATEGIESFORTREHALOSESYNIHASEGE EIIJCE GlEERlGBACIIERlA 0NHIGH—DENSITYFERMENTATION CHENYing，ZHANGJun，LIMing-chun，QIXin，TANGLiu (1．TianjinResearchInstituteforForestryandPomolgy，Tianjin300112，China； 2．CollegeofLifeScience，NankaiUniversity，Tianjin300071，China) Abstract：Withthedevelopmentofgeneticengineeringtechnology，thepreparation oftrehalosehasbeen broughtintothefieldofmolecularbioloyg．Butthestudyoftrehalosesynthasegeneworksonthehigh-density fermentationisseldom reposed．Thispaperrepoflssomeinfluencingfactorsontrehalosesynthasegeneworksof high-densityfemr entation，andprovidesatheoreticalbasisofrtrehalosesynthasegeneengineeringindustrial production． Keywords：trehalosesynthase；geneticengineeringbacteria；high-densityfemr entation 基因工程技术的发展将海藻糖制备工艺带人分 水平受宿主细胞、重组体的稳定性、培养基成分、培养 子生物学领域。然而关于海藻糖合酶基因工程菌的高 方式、培养条件以及培养过程中抑制性代谢产物的积 密度发酵的研究却鲜有报道。随着基因工程技术突飞 累等多种因素的影响，能否实现高密度培养及高 目标 猛进的发展．利用工程微生物和酶工程改进海藻糖的 产物浓度 ．是工程菌能否以较低成本实现规模生产的 生产，提高产量，降低成本是运用分子生物学研究开发 决定性因素。 海藻糖制备新工艺最有可能得到廉价产品的方法。 1996年．株式会社林原生物化学研究所的Tsusaki等 1 基因工程菌的宿主菌及质粒的影响 人披 露 了克 隆 自Pimelobactersp．R48和 Thermus 重组蛋白的高效表达 ，离不开一个好的菌株和一 aquaticus的海藻糖合酶基因的DNA序列及其构成该 个高效的表达载体 。宿主菌和质粒载体的选择直接决 酶的氨基酸序列㈣。随着现代生物技术尤其是基因工 定着表达产物的数量和质量。 程技术的迅速发展，相继从多种微生物中克隆了海藻 由于人类对大肠杆菌特性的了解较为深入，利用 糖合成的相关酶基因，利用基因工程菌进行异源高效 大肠杆菌为工程菌生产蛋 白质是 目前工业生产 中最 表达已经成为现今的一个研究热点3[1。基因工程菌(细 常用的技术。人类已成功地使用大肠杆菌工程菌生产 胞)的高密度发酵是外源基因能否实现高水平表达 ， 了干扰素、白细