0同时蒸馏萃取_气质联用分析养殖暗纹东方鲀肉中的挥发性成分.docVIP

同时蒸馏萃取-气质联用分析养殖暗纹东方鲀肉中的挥发性成分* 摘要分别以二氯甲烷和乙醚作溶剂，同时蒸馏萃取(SDE)养殖暗纹东方鲀肉中的挥发性成分，结合气质联用(GC-MS)对挥发性成分进行定性，以2，4，6-三甲基吡啶内标定量分析，并结合主成分分析法(PCA)对挥发性成分进行数据挖掘。结果表明:乙醚为溶剂时，总共鉴定到了57种成分，含量较高的是十四醛、十八醛、十八醛、乙酸乙酯、十六酸等;以二氯甲烷为溶剂时，总共鉴定到了78种成分，主要是十六醛、2，3-丁二酮、十六酸等。比较得出，二氯甲烷溶剂在定性方面有优势，乙醚溶剂在定量方面效果较好。2种溶剂萃取一共检测出96种化合物，其中醛类29种、酮类11种、醇类16种、含氮含硫及杂环类化合物22种、酯类7种、酸类3种、烷烃类8种。河豚鱼英文名pufferfish，与鲥鱼、刀鱼并称“长江三鲜”。长期以来，我国沿海地区一直有吃河豚鱼的习惯;日本人、韩国人也把河豚鱼视为珍馐佳肴。近年来由于野生资源过度利用、控毒技术的日益完善、养殖规模不断扩大，养殖河豚鱼越来越受到国内外消费者的欢迎。人们对开放鲜河豚市场的呼声也越来越高，养殖河豚鱼巨大的市场经济价值越来越突显。统计数据显示，目前国内食用较多的品种为淡水养殖的暗纹东方鲀，多以熟食为主。而目前对暗纹东方鲀的研究报道主要集中在毒性及一些营养评价，但对风味物质的研究国内外鲜有报道，因此探究河豚鱼美味奥秘及不同养殖环境下风味的差异能够为河豚鱼的养殖和加工食用及改善河豚鱼肉品质提供指导，具有十分现实的意义。近年来，关于鱼肉中挥发性成分提取的方法有溶剂萃取法、固相微萃取、溶剂辅助蒸馏萃取技术和顶空吹扫捕集、同时蒸馏萃取法等，前4种前处理方法存在一定缺陷，如溶剂萃取法耗时、风味物质损失大;固相微萃取萃取头对风味物质有较大选择性;溶剂辅助蒸馏萃取技术装置比较复杂，仪器的清洗比较费时;顶空吹扫捕集不利于挥发性低的化合物的捕集而其中同时蒸馏萃取是近年来使用较多的一种提取、分离和富集试样中挥发性、半挥发性成分的有效方法，能将水蒸气蒸馏与溶剂萃取合二为一，从而减少了试验步骤，缩短了分析时间，节省了萃取溶剂。而目前有关河豚鱼风味研究报道国内仅有邓捷春等采用了顶空固相微萃取技术结合GC-MS对其挥发性成分进行了研究。所以本实验分别以二氯甲烷和乙醚作溶剂，采用同时蒸馏萃取法(SDE)，提取养殖暗纹东方鲀肉中的挥发性成分，结合感官评价和电子鼻技术对提取的挥发性成分进行比较，采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)对挥发性成分进行定性和内标定量分析，并采用主成分分析(PCA)对挥发性成分进行数据挖掘。旨在为探究河豚鱼美味奥秘及改善河豚鱼肉品质等方面提供有参考意义的基础理论数据。 1材料与方法 1.1实验材料 暗纹东方鲀:采自江苏省中洋集团河豚鱼养殖基地，2龄鱼，平均体重350g左右(12条)，置于充水、充氧的聚乙烯袋中，运回实验室活杀。去眼、皮及内脏等废弃物后，鱼肉于－18℃贮藏待用。1.2主要试剂无水Na2SO4(将分析纯Na2SO4在550℃下灼烧2h，冷却后置于干燥器内备用);重蒸二氯甲烷、乙醚(将分析纯二氯甲烷、乙醚蒸馏，去掉前30mL以及后30mL的馏分，取中间二氯甲烷、乙醚馏分备用，重蒸后的二氯甲烷、乙醚经GC-MS检测无杂质峰出现);氯化钠(分析纯)，以上试剂购自上海国药试剂公司。C7－C30饱和烷烃(1000μg/mL，溶于正己烷溶液中)购自美国sigma公司，2，4，6-三甲基吡啶(纯度，99%)(内标)购自上海安谱科学仪器有限公司。 1.3主要仪器与装置 同时蒸馏萃取装置(安徽优信玻璃仪器厂);Old-ershow浓缩柱(浙江台州玻璃仪器厂);5975B型质谱和6890N型气相色谱(美国Agilent公司);DHT型搅拌调温电热套(山东鄄城创新仪器有限公司);恒温水浴锅(上海申生科技有限公司);DL－2020节能型低温冷却循环泵(宁波新芝生物科技股份有限公司);FOX4000电子鼻(阿法莫斯公司)。 1.4样品处理 将贮于－18℃冰箱中的暗纹东方鲀肉在4℃冰箱中解冻12h，然后将已解冻的鱼置冰上用刀取其背肉。将取下的肉置玻璃皿中，盖上玻璃皿盖，放在蒸锅中用电磁炉蒸20min以保证鱼肉全熟。蒸好后迅速置于冰上冷却，再将冷却后的鱼肉绞碎备用。 1.5同时蒸馏萃取(SDE)取处理好的鱼肉样品150g加250mL去离子水，加入50μg2，4，6-三甲基吡啶后，用匀浆机匀浆后置于1000mL圆底烧瓶中，加入沸石和磁力搅拌子，接SDE装置的右端，用电热套加热至微沸;装置的左端接100mL圆底烧瓶，内装50mL重蒸乙醚，恒温50℃水浴加热保持乙醚沸腾;用－5℃的乙醇作冷却循环液，萃取3h后在萃取液中加入5g无水硫酸钠，放入－18℃冰箱内冷冻过夜;过滤，滤液用Older-sho