高糖对人脐静脉内皮细胞凋亡、NF-κB-iNOS-NO通路的影响及硫辛酸的干预作用.pdf

1 ． ． r．7 0乙L：：．、。 目 录 中文摘要………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………3 研究论文高糖对人脐静脉内皮细胞凋亡、NF．1出．iNOS-NO通路 的影响及硫辛酸的干预作用 OO OO BOOO oOoI OOO OOO…………O“””““” OO ”．b…6 前言………………………·…··……日lJ舌”…””…～一“”一”””””“”… 材料与方法…………………………………………………………7 结果”“”””一“…””””””一“”一””一””“·”··”一”“一””””一·16 OOOOOOEOOOOOOO…18 附图…………………………………………………O 附表…………………………………………………………………22 讨彰台······……·”····”·“·…····……·······”··”··········”·····…····25 参考文献……………………………………………………………28 OOOOOOOOODOOOO…31 综述NF．1①与糖尿病………………………………O 致谢”……一””“·········……………··························…·····一··38 个人简历………………………………………………………………39 目的：糖尿病(diabetes 特征的代谢疾病，主要病因是胰岛素抵抗和胰岛p细胞功能衰竭。长期慢 性的血糖控制不良，以及随之而来的高血脂、高血压，可以导致心，眼， 肾，足等多个脏器的并发症，严重影响人们的生活质量。氧化应激信号通 路激活会导致胰岛素抵抗和胰岛素分泌受损，氧化损伤主要由活性氧物质 (reactive oxygen species，ROS)禾n活性氮物质(reactivenitrogen 所致，它们是细胞代谢过程中产生的含氧或含氮的活性产物，可通过脂质 过氧化等途径诱导组织细胞损伤，具有重要的生理和病理意义。氧化应激 不仅也参与了2型糖尿病发病过程，而且构成糖尿病晚期并发症的发病机 制。动脉粥样硬化是糖尿病大血管病变的病理基础，氧化应激亦在其中发 挥重要的作用。英国的前瞻性研究表明，仅仅控制好血糖并不能有效的降 低大血管并发症的发病率，这提示我们，虽然血糖是造成糖尿病大血管病 变的始动因素，但是不是唯一因素，在大血管病变发展的过程中，还有别 的因素参与进来。血糖升高会导致内皮细胞功能不良，凋亡，内皮完整性 及保护作用遭到破坏，屏障作用消失，黏附分子表达增加，趋化因子释放， 白细胞黏附，巨噬细胞活化，平滑肌细胞迁移和增殖，最终形成动脉斑块。 NF．心作为核转录因子，参与了氧化应激、多种炎症反应和免疫反应。 NF．rB可以激活多种免疫和炎症反应有关的基因包括iNOS、白介素．1，6、 干扰素、肿瘤坏死因子．a、血管细胞粘附分子．1和胞间粘附分子【l】。NF．1出 也可通过调整自身克隆基因和IrB的表达水平以达到自身调节的目的【2】。 用原位杂交和免疫组织技术研究发现，在小鼠内皮细胞受损伤后45分钟，在 其受损的内皮细胞核中NF-r．．B p65矛llp50蛋白亚体含量明显较正常为高，3 量的实验研究涉及到NF．r,B及其所诱导表达的细胞因子在方方面面的应 用，本实验就是体外观察高糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡及产 中文摘要 作用，并应用硫辛酸干预，探讨该药的可能作用及机制。 方法： 体外培养HUVEC细胞，分为5组：(1)对照组(葡萄糖浓度： 5．5mmol／L)(2)高糖组： 应用流式细胞术测细胞凋亡，Western iNOS，硝酸还原酶