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卷 期 生 物 工 程 学 报
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富含二硫键的膜蛋白!#$ 胞外区在大肠杆菌中的可溶性表达和性质鉴定
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李良维，刘海波，胡思怡，梁 顿，程联胜 ，刘 兢
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RS R2=EDLT02 RSU K=2LV( KU G2LW2 RS9+X 5-E IKP+X R2=ELG@0ED =E4 RSU ,2ED
中国科学技术大学生命科学学院细胞免疫学实验室，合肥 !$$!
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摘 要 基因（其产物为膜蛋白 ）是表皮生长因子受体（ ）基因家族的一员，在约 的乳腺癌中发现
K08!Y 1L087VL! :J% PXH/ $ Z
了其过量表达。为了鉴定抗:J% 单克隆抗体的抗原表位并进一步研究它们的相互作用，采用MI/ 的方法从含 K08!Y 1L087VL!
基因的:V=70Y 087VL! 质粒中扩增了:J% 胞外区的富含二硫键的第一、二结构域和第四个结构域。产物克隆到:XP[Y#?L 载体
后，转化大肠杆菌 （ ） 菌株，用低浓度 进行低温过夜诱导后将菌体压力破碎， 检测表达上清，
\82D=62 V 5P :R.AG SM?X G5GLM9XP
得到了可溶性表达的融合有 的目的蛋白。经 、 等方法鉴定，可溶性表达产物具有完全的抗体结合活性，
XG? PRSG9 T0A;08E 7)(;
且当用凝血酶把XG? 切掉后该活性仍然保留。:J% 胞外区融合蛋白的成功表达将为二硫键富含类蛋白的表达提供参考；并
为将来具有肿瘤细胞生长抑制活性的抗:J% 单克隆抗体的抗原表位鉴定，以及为PXH/ 家族受体的结构和功能关系的研究
打下基础。
关键词 胞外区，融合蛋白，谷胱甘肽 转移酶
:J% G
中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ）
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