2014届高考生物全程复习（2012年新课标版高考真题）考点21基因工程.docVIP

考点21 基因工程 选择题 1.(2012·浙江高考·T6)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是(　　) A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因B B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞 【解题指南】解答本题的关键是明确获取目的基因的方法和基因工程的工具及步骤。 【精讲精析】选A。具体分析如下: 选项 具体分析 结论 A项 获取目的基因的方法有从基因文库中获取,包括基因组文库和cDNA文库。从cDNA文库获取就是先获取mRNA,再逆转录获得互补的DNA,然后扩增 正确 B项 限制性核酸内切酶用于切割目的基因而不是获取目的基因 错误 C项 利用DNA连接酶将基因B与质粒连接 错误 D项 基因B与质粒连接形成重组质粒再导入农杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞 错误 二、非选择题 2.(2012·全国新课标·T40)根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有　 和　　 。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下: 　　　　　　　AATTC……G G……CTTAA 为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是　 。 (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即　　　　　DNA连接酶和　　　　　DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是　　　　　,产物是　　　　　。若要在体外获得大量反转录产物,常采用　　　　　技术。 (5)基因工程中除质粒外,　　　　　和　　　　　也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 【解题指南】解答本题需掌握以下知识: (1)限制性内切酶的作用和特点。 (2)DNA连接酶的种类。 (3)运载体的类型。 (4)受体细胞的选择原理。 【精讲精析】(1)当限制性内切酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制性内切酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的是平末端。 (2)为使运载体与目的基因相连,不同的限制性内切酶应该切出相同的黏性末端。 (3)DNA连接酶根据其来源的不同分为两类,一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E·coli DNA连接酶,另一类是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4 DNA连接酶。 (4)反转录是指以RNA为模板在逆转录酶的作用下合成DNA的过程,可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(多聚酶链式反应)。 (5)基因工程中可以作为运载体的除质粒外,还有噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (6)大肠杆菌细胞有细胞壁和细胞膜,能阻止质粒(外源DNA)等物质的进入,只能通过Ca2+处理细胞,使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)才能作为受体细胞。 【参考答案】(1)黏性末端　平末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)E·coli　T4 (4)mRNA(或RNA)　cDNA(或DNA)　PCR (5)噬菌体的衍生物　动植物病毒 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 3．（2012福建高考·T32）肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图１。 请回答： （１）进行过程①时，需用　　　　酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为　　　　。 （２）进行过程②时，需用　　　　酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于 传代培养。 （３）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取　　　　进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中　　　　（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。 【解题指南】解答本题的关键是：（1）注意目的基因和运载体需用同一种限制性核酸内切酶切割；（2）注意题干信息“let-7基因在肺癌细胞内表达时，肺癌细胞的增值抑制”，由此推出肺癌细胞增值受到抑制的原因是let-7基因翻译抑制。