2015届高考生物总复习基础知识1-3-1《降低化学反应活化能的酶》实验与酶相关的》实验探究（5年9考）新人教版必修1.docVIP

实验 　与酶相关的实验探究(5年9考)　 (2012福建、全国卷，2011全国卷、江苏卷……) [要点突破] 1．验证酶的本质 (1)验证酶是蛋白质 ①实验组：待测酶溶液＋双缩脲试剂―→是否出现紫色反应； ②对照组：标准蛋白质溶液＋双缩脲试剂―→紫色反应。 ③变量分析：自变量为待测酶溶液和标准蛋白质溶液；因变量为是否有紫色反应。 ④实验结果分析：通过对照，实验组若出现紫色，证明待测酶的化学本质是蛋白质；不出现紫色，则该酶液的化学本质不是RNA。 (2)验证酶是RNA ①实验组：待测酶溶液＋吡罗红试剂―→是否出现红色； ②对照组：标准RNA溶液＋吡罗红试剂―→出现红色。 ③变量分析：自变量为待测酶溶液和标准RNA溶液；因变量为是否出现红色。 ④实验结果分析：通过对照，实验组若出现红色，证明待测酶的化学本质是RNA；不出现红色，则该酶液的化学本质是蛋白质。 2．验证酶的催化作用 (1)实验组：底物＋相应的酶液―→底物是否被分解； (2)对照组：底物＋等量蒸馏水―→底物不被分解。 (3)变量分析：自变量为相应的酶液的有无；因变量为底物是否被分解。 (4)实验结果分析：根据底物性质利用相应试剂检测，若底物被分解，则证明酶具有催化作用，否则不具有催化作用。 3.验证酶的专一性 (1)方案一：用同种酶催化两种不同物质 实验组：反应物＋相应酶溶液―→反应物被分解；对照组：另一反应物＋等量相同酶溶液―→反应物不被分解。 (2)方案二：用两种不同酶催化同一物质 实验组：反应物＋相应酶溶液―→反应物被分解；对照组：相同反应物＋等量另一种酶溶液―→反应物不被分解。 变量分析：方案一中的自变量为反应物的不同，方案二的自变量为酶溶液的不同，因变量均为反应物是否被分解。 特别提醒 ①选择好检测反应物的试剂，如反应物选择淀粉和蔗糖，酶溶液为淀粉酶，则适宜选用斐林试剂检测反应物是否被分解，不能选用碘液，因为碘液无法检测蔗糖是否被分解。 ②保证蔗糖的纯度和新鲜程度是做好实验的关键 4．验证酶的高效性(案例——比较过氧化氢在不同条件下的分解) 变量分析： 注意事项 (1)实验时必须用新鲜的、刚从活的动物体中取出的肝脏作实验材料。肝脏如果不新鲜，肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解，使组织中酶分子的数量减少且活性降低。 (2)实验中使用肝脏的研磨液，可以加大肝细胞内过氧化氢酶与试管中过氧化氢的接触面积，从而加速过氧化氢的分解。 (3)滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液时不能共用一支滴管，因为酶的催化效率具有高效性，少量酶带入FeCl3溶液中就会影响实验结果的准确性，甚至使人产生错觉，作出错误的判断。 5．温度对酶活性的影响 (1)原理解读 ① ②温度影响酶的活性，从而影响淀粉的水解，滴加碘液，根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。 (2)实验设计思路 (3)实验设计程序 本实验不宜选用过氧化氢酶催化过氧化氢分解，因为过氧化氢酶催化的底物过氧化氢在加热的条件下分解也会加快。 6．pH对酶活性的影响 (1)原理解读 ①2H2O22H2O＋O2 ②pH影响酶的活性，从而影响O2的生成量，可用点燃但无火焰的卫生香燃烧的情况来检验O2生成量的多少。 (2)实验设计思路 O2的产生速率 实验注意事项 (1)由于H2O2不稳定，因此探究温度对酶活性影响时，不选择H2O2作反应物。同时也不宜选用斐林试剂鉴定，温度是干扰条件。 (2)在验证酶活性受pH影响时不宜选用淀粉酶催化淀粉水解，因为淀粉酶催化的底物淀粉在酸性条件下也会发生水解反应。 [典例透析] 【典例】 (2012·福建理综，26)大菱鲆是我国重要的海水经济鱼类。研究性学习小组尝试对大菱鲆消化道中蛋白酶的活性进行研究。 (1)查询资料得知，18 ℃时，在不同pH条件下大菱鲆消化道各部位蛋白酶活性如图1。由图可知，在各自最适pH下，三种蛋白酶催化效率最高的是________。 (2)资料表明大菱鲆人工养殖温度常年在15～18 ℃之间。学习小组假设：大菱鲆蛋白酶的最适温度在15～18 ℃间。他们设置15 ℃、16 ℃、17 ℃、18 ℃的实验温度，探究三种酶的最适温度。 ①探究实验中以干酪素为底物。干酪素的化学本质是________，可用________试剂鉴定。 ②胃蛋白酶实验组和幽门盲囊蛋白酶实验组的pH应分别控制在________。 ③为了控制实验温度，装有酶和底物的试管应置于________中以保持恒温。单位时间内________可以表示蛋白酶催化效率的高低。 ④实验结果如图2，据此能否确认该假设成立？________。 理由是：____________________。 (3)研究还发现大菱鲆消化道淀粉酶和脂肪酶含量少、活性低，所以人工养殖投放的饲料成分中要注意降低________的比例，以减少对