番茄红素脂质体与制备.docVIP

番茄红素脂质体的制备 田艳燕 段相林 常彦忠 （河北师范大学 河北省动物生理生化与分子生物学重点实验室，河北 石家庄 050016） 摘 要： 目的：制备番茄红素脂质体。方法：采用薄膜-超声法制备番茄红素脂质体，通过剧命运设计法优化出了番茄红素脂质体的组分及制备工艺，应用高效液相色谱法测定番茄红素的含量，用差示扫描量热法检测番茄红素脂质体各组成物质的相变过程。结果：番茄红素脂质体的最佳配方比为：番茄红素：胆固醇：磷脂=3：10：100；最佳水合介质是0.01 mol/L PBS（含0.5%五聚甘油硬脂酸酯）；最适洗膜温度为31 ℃。结论：番茄红素脂质体呈均一大单室型，有效粒径0.7 μm，最大包封率68%。 关键词： 番茄红素；脂质体；均匀设计；差示扫描量热法 番茄红素（Lycopene，LYC）是一种脂溶性天然色素，是类胡萝卜素的一种。其分子式为C40H56，分子量是536.88，含有11个共轭双键和2个非共轭双键碳碳双键。它是非VA前体的类胡萝卜素[1]。番茄红素不溶于水，难溶于甲醇等极性有机溶剂，可溶于乙醚、己烷、丙酮，易溶于氯仿、苯、油脂等，色泽为红色[2]。作为平面共轭多不饱和烯烃，番茄红素具有抗氧化、清除过氧化自由基、防癌抗癌、延缓衰老、上肢心血管疾病的保健功能，其抗氧化性能在类胡萝卜素中最强，清除单线态氧的能力是目前常用的抗氧剂VE的100倍、β-胡萝卜素的2倍多[3-4]。目前已被联合国联农组织（FAO/WHO）联合国食品添加剂委员会（JECFA）认定为A类营养素，被广泛应用于保健食品、医药和化妆品[3]。我们最新的研究证实番茄红素还具有预防脑缺血损伤的作用[5]。番茄红素在加工和贮藏过程中易被氧化降解[3]，进而会影响到产品的保存价值和生物利用率。本实验针对番茄红素在光、热和氧的作用下容易被氧化降解，生物利用率不高等特点，为增加番茄红素的水溶性和提高番茄红素的稳定性，采用旋转薄膜-超声法[5]制备番茄红素脂质体，并对其组分和制备工艺进行了优化。 1 材料与方法 1.1 材料 番茄红素粉末（纯度99%） 华北制药提供；番茄红素标样 Sigma公司；大豆卵磷脂 北京华清美恒公司；胆固醇 北京鼎国生物技术发展中心。 1.2 主要试剂 乙腈（色谱纯） 美国Dikmapure；甲醇、二氯甲烷（色谱纯） 天津科康德；抗氧剂BHT 南京太伟明科公司；吐温-80 天津大茂试剂；五聚甘油硬脂酸酯 山东圣源化学科技有限公司；其他试剂均为分析纯。 1.3 仪器 Ra-52型旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂；CPS2超声波粉碎机 宁波新芝超声有限公司；OlympusCK2倒置显微镜 日本Olympus光学公司；JEM100SX透射电子显微镜 日本电子公司；JI-1155型激光散射粒度测定仪 成都精新粉题测试设备公司；液相色谱仪 Amasham公司；TU-1800/1800S型紫外-可见分光光度计 北京普析通用仪器有限责任公司；热分析系统 美国PE公司，DSC7。 1.4 方法 1.4.1 均匀设计优化番茄红素脂质体的配方 影响因素和水平的确定及实验标的安排，根据预试验并总结有关文献资料，筛选对番茄红素脂质体制备是形成于少杯壁上的类脂薄膜在介质中的分散性能、水合难易程度、脂质体混悬液沉降稳定性等有影响的5种因素：胆固醇与磷脂的质量比（Chol∶PC）、番茄红素与磷脂的质量比（LYC∶PC）、水合介质种类（Vehicle）、水合介质用量（Volume）、有机溶剂挥发温度（Temperature），每个因素选12个水平（拟水平）。根据均匀设计法原理和适用原则，按均匀设计表U12（125）进行拟水平试验，列出实验方案，见表1。 表1 番茄红素脂质体配方均匀设计试验表 实验号 Chol：PC LYC：PC 水和介质种类 水和介质用量/mL 有机溶剂挥发温度/℃ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1.0：10 1.0：10 1.0：10 1.5：10 1.5：10 1.5：10 2.0：10 2.0：10 2.0：10 2.5：10 2.5：10 2.5：10 0.01：1 0.02：1 0.03：1 0.04：1 0.01：1 0.02：1 0.03：1 0.04：1 0.01：1 0.02：1 0.03：1 0.04：1 0.01molPBS+0.5%甘油脂 0.02molPBS+0.5%吐温80 0.01molPBS+0.5%吐温80 0.02molPBS+0.5%甘油脂 0.02molPBS+0.5%吐温80 0.01molPBS+0.5%吐温80 0.02molPBS+0.5%甘油脂 0.01molPBS+0.5%甘油脂 0.01m