灵芝菌丝体液体发酵研究.pdfVIP

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I基础研究 灵芝菌丝体液体发酵研究 王金亮,李 晔,翁民道,陈先娟,张河溪 (福建仙芝楼生物科技有限公司,福州康爱生物医药研究中心,福州350002) 摘要:以筛选的灵芝菌种G2,通过单因素试验和交试验优化了液体发酵的培养基配方和发酵罐控制条件。结果表明, 灵芝G2的最适培养基为:玉米淀粉2%、蔗糖1.5%、豆饼粉I.5%、酵母粉0.6%、KH2P04 0.1%,MgS04·7H200.05%,V。。lOppm: 最适发酵罐控制条件为:26。C,pH (V/(V·rain))。在这些条件下进行深层培养时,生物量浓度达3.659/100mL,发酵液含多糖2.72mg/mL。 关键词:灵芝;茵丝体;液体发酵;优化 中图分类号:T0920 文献标识码:A 0 引 言 灵芝广泛应用于医药及保健食品行业,灵芝含有多糖、氨基酸、蛋白质、甾类、三萜类、香豆甙、挥发油、树脂、 油类及少量无机离子,此外还含有生物碱、B.谷甾醇等物质,其药理作用广泛,对多种疾病有较好的疗效,灵芝多糖 则是灵芝中最有效的成分之一,灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关【l】。近来大量研究表明灵芝多糖具有提高机 体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑肿瘤, 抗辐射, 提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质 的能力等,即通过直接或间接的对免疫系统的影响,维持机体的免疫调节平衡,提高机体抗病能力【2】。灵芝野生资源 稀缺,而人工栽培周期长(2个月以上),劳动强度大,占地多,受环境、区域、季节、原材料等限制,且易遭病虫害, 质量不稳定【31;目前,灵芝多糖和灵芝酸主要从灵芝子实体和孢子中获得,且需要繁琐的破壁和浸提工艺,限制了灵 f4】,此法生产灵芝活性物质已成为国内外研究的热点【5,61。本实验以福建特有的灵芝为菌种,对灵芝液体发酵进行了 研究,旨在为灵芝深层发酵技术的推广应用及产业化提供技术支持。 1材料与方法 1.1供试菌株采用由福建省农业科学院提供省内有代表性的三个菌株,分别编号为G1,G2,G3。 MgS04·7H200.05%,VBl10ppm;液体种子培养基和深层发酵培养基由试验优化确定。 1.3主要仪器与设备 公司制造);离心机(型号:PRISMTM 海国强生化工程装备有限公司制造)。 1.4方法 1.4.1灵芝菌种的筛选 180 第四届全国农产品加工科研院所联谊会暨中国农产品加工技术创新体系建设研讨会论文集 ℃连续培养7d,每天测量菌丝的增长速度(单位ram/d),5板取平均值。 度以及菌丝体多糖以及观察菌液的性状。 1.4.2灵芝液体培养基配方的优化 1.4.2.1碳源的选择以筛选的灵芝菌种进行试验,分别以2%的不同碳源【7,8,9】(蔗糖、葡萄糖、乳糖、玉米淀粉、玉米 记录发酵时间和测定多糖含量,对比不同碳源对发酵的影响。 值不再变化时终止发酵,记录发酵时间和测定总糖含量,对比不同氮源对发酵的影响。 1.4.2.3最佳培养基配方的确定根据单因素试验结果,用试验确定的碳源和氮源替代基础培养基中的碳源和氮源,采 用正交试验对培养基配方进行优化。 1.4.3灵芝发酵罐液体培养控制条件的优化 用1.4.2优化的发酵培养基配方进行发酵罐试验,以菌丝体生物量和发酵液多糖为试验指标,以搅拌速度、通气量 行优化,因素水平水平表如下: 表1发酵罐液体发酵控制因素水平表 水平————————————————————————————上塑王—————————————————————————一 塑堂垄鏖型竺也 望皇量!塑∑:竺虫2 壁登苎垡 l 180 l:O.3 2 200 l:0.5 3 220 l:0.7 1.4.4测定方法 称取重量即为菌丝体的生物量。 1.4.4.2多糖含量的测定采用蒽酮.硫酸法【11】进行测定。 1.4.4.3 p

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