实验五叶绿体色素的提取、分离及理化性质的鉴定.pptVIP

一、实验目的 了解也绿色提取分离的原理以及它们的光学特性和在光合作用中的意义 二、实验原理 叶绿体色素室植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质，主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。根据它们在有机溶剂中的溶解特性，可用丙酮将它们从叶片中提取出来，并可根据它们在不同有机溶剂中的溶解度不同以及在吸附剂上的吸附能力不同将它们彼此分开。 叶绿素是一种双羧酸的酯，可与碱发生皂化作用，产生的盐能溶于水，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开。叶绿素与胡萝卜素都有光学活性，表现出一定的吸收光谱，可用分光镜检查和用分光光度计精确测定。叶绿素在光照下可产生暗红色的荧光；叶绿素的化学性质很不稳定，容易受强光破坏，特别是叶绿素与蛋白分离后光破坏更快；叶绿素中的镁可被H+取代，称为褐色的去镁叶绿素；加入铜盐后则成为铜代叶绿素，铜代叶绿素很稳定，在光下不易破坏，故常用此法制作子午的浸制标本。 三、器材与试剂 ?仪器：带盖培养皿、台天平、研钵、量筒、烧杯、漏斗、软木塞、新华滤纸、毛细滴管、剪刀、分液漏斗、移液管、分光计。 ?实验试剂：丙酮、甲酯、醋酸铜、盐酸、氢氧化钾、石英砂、碳酸钙、无水硫酸钠、四氯化碳、乙醚。 ?材料：菠菜叶片 一、叶绿体色素的提取与分离 1、称取新鲜叶片2 g，放入研钵总加入丙酮5 ml，少许碳酸钙和石英砂，研磨成匀浆，再加丙酮10 ml，以漏斗过滤，滤液即为色素