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犬组织细胞瘤超显微结构之研究 陈三多1唐延波2宋立新2 (1台湾中兴大学兽医病理研究所；2大连东日动物医院) 摘要：组织细胞瘤因其细胞形态与淋岜瘤、传染性花柳性肿瘤等其它圆形细胞瘤菲常 相似，故本实验将组织细胞瘤进行组织病理学，细胞超显微结构及免疫组织化学染色等研 究。在组织病理学方面，组织细胞瘤细胞问有纤细的问质，肿瘤细胞外形呈圆形至卵圆形， 核大两明显，呈圆形至卵圆形，有些可见呈豆状或有皱折，形状大小不一，细胞质丰富淡染， 着色不佳，细胞问界限不明显。以电子显微镜观察，组织细胞瘤细胞呈圆形至卵圆形，细胞 闯紧密排歹lJ，细胞核大，核仁明显，核内禽大量均质的真染色质，细胞质丰富，细胞质内胞器 包括有高尔基氏体、粒线体、核糖体、颗粒内质网及溶素体的构造。免疫组织化学染色分析 specific 织来源的细胞。 关键词：组织细胞瘤、细胞超显微结构、免疫组织化学染色 绪言 组织细胞瘤是由皮肤的单核球一巨噬细胞系统而来，为犬皮肤常见的肿瘤，为所有皮 大多发生于头部、脸及耳朵等部位的皮肤，呈单一、直径约0．5—4公分，外形呈半球形突起， 表皮缺乏毛发或发生溃疡，生长快速，但可自行消退，切除后很少再发，转移亦少见，故属于 一种良性的肿瘤。 由于组织细胞瘤的组织相与其它圆形细胞瘤非常相似。尤其与发生于皮肤的淋巴瘤或 全身转移的传染性花柳性肿瘤，在病理切片诊断上很难鉴别，因此本实验的目的在应用组 织切片技术、免疫组织化学染色技术及穿透式电子显微镜技术等方法，钊。对组织细胞瘤之 组织病理变化、免疫组织化学染色及肿瘸细胞之超显微结构等特性做深入的研究，以了解 组织细胞瘤构造之特性，藉以找出更准确的判定方法来诊断此病。 材料与方法 (一)病例收集及病材处理 本实验所用之组织细胞瘤病材是甫动物医院所收集之犬组织细胞瘤病例，经临床兽医 师对该病例之基本资料、临床症状．肉眼病变检查做详细的分析，初诊确认后，以外科手术 采得之肿瘤病变组织，作成石蜡切片，以常规之苏木索及伊红染色，进行组织病理学诊断， 井进一步做免疫细胞化学染色鉴定，再将肿瘤病材作成超薄切片，以进行细胞超显微结构 之观察与比较。 (二)组织病理学检查 309 所收集之病材以10％之中性福尔马林溶液同定，经酒精脱水，石蜡包埋等过程，以切片 机切成61aJn厚，再以苏木素及伊红染色．阿拉伯胶封片后以光学显微镜观察。 (三)免疫组织化学染色法 将病材之石蜡切片经脱蜡、蒸馏水清洗后，再以缓冲生理食盐水溶液洗三次，加人0． (neurone—specific 标有Biotin之次级抗体作用5分钟．加入ABC作用剂作用5分钟，以蒸馏水洗三次，加入 EnhancingSolution作用15秒，再以蒸馏水洗三次，加入苏木素染色1分钟，以蒸馏水洗三 次，封片后以光学显微镜观察。 (四)穿透式电子显微镜观察 将肿瘤组织切成1mm3，装入1．5ml之微量离心管中，以4％戊二醛，于4℃固定24小 时后，以蒸馏水洗3次，再以l％四氧化锇缓冲溶液，振荡1小时，以蒸馏水洗3次后，于 30％、50％、70％、80％、90％、95％及100％洒精中脱水，然后包埋于Spurt‘Smedium中，包 埋完成后的样品块，先切成ltxm厚之半薄切片，染以甲苯胺蓝，确定所要的组织部位后，再 以超薄切片机切成75nm之超薄切片，经柠檬酸铅及醋酸铀做双重染色后，以穿透式电子显 微镜观察及照相。 实验结果 (一)肿瘤肉眼观察 本实验所用之肿瘤病例，发生于一岁龄之八哥犬(Pug)脸部皮肤，生长伙速，外形呈半 球形突起，直径0．6公分，质地坚实．表面因抓伤而破溃。 (二)组织病理学观察 于组织学观察中可见肿瘤细胞浸润于真皮层与皮下层，细胞较多形性．似单核球。肿 瘤细胞外形呈圆形至卵圆形，大而明显的核呈圆形至卵圆形，有些可见呈豆状或有皱折，形 状大小不一，细胞质丰富淡染，着色不佳，细胞问界限不明显，肿瘤细胞之细胞核呈圆形至 卵圆形，大小不一，有些细胞核呈咖啡豆样、C形或有皱折的情形(图1)。 (三)免疫组织化学染色结果 肿瘤组织之免疫组织化学染色结果，可见组织细胞瘤对vimentin抗体呈强阳性反应，于 体处理均呈阴