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LTS液基细胞学制片联合残留液HPV16／18检测 在筛查早期宫颈癌应用价值的研究 兰淼李艳红★★朱少君韩秀娟任拼姚丽 张伟★ (第四军医大学唐都医院妇产科) 应用价值。方法。采用LTS液基细胞制片法检测800例妇产科患者宫颈外口及颈管脱落细胞和分泌物，将 下多点活检，结合病理结果分析宫颈病变。结果{1000例样本经LTS检测正常者870例，ASCUS24例， ASCUS-H 26例，LS几61例，HS几19例。130例细胞学异常者阴道镜下多点组织活检证实炎症7l例，C INIl8例，CINIl21例，CINIII INII33．3％，CINIII 感染率分别为：正常或炎症21．1％，CINll6．7％，C 69．2％，浸润癌100％，湿疣40．0％。 65例LTS正常，H IM PVl6／18阳性患者病理检测显示炎症51例，c m)v16，18检测可以补充细胞学检查结果，对筛查早期宫颈癌有重要意义。 【关键词】HPVl6／18；液基细胞检测；宫颈炎；宫颈癌 ical 宫颈癌(cerv 类宫颈癌细胞中可检测到HPVDNA，由于宫颈癌存在着一个较长的、可逆转的癌前病变期，早期宫颈癌 患者5年治愈率高达90％，所以早期发现一过性HPV携带者对早期诊断、早期治疗尤为重要‘11。 LTS技术对传统的巴式涂片进行了改良，制备的薄层涂片细胞信息量大，而且清晰便于阅读。本文对 义，为提高宫颈癌前病变的诊断和分类、制定良好治疗方案、评价治疗效果和治疗后随访提供可靠的依据。 l材料与方法 1．1材料 1．1．1病例选择 的1000例患者作为观察对象。人选患者从未进行LTS、阴道镜等相关检查及治疗，均有性生活史，且无 子富切除史，无宫颈鳞状上皮内病变史。人选患者年龄最小的16岁，最大的77岁，平均年龄36．23岁。 对其中细胞学筛查阳性和临床高度怀疑宫颈病变的患者行阴道镜检查和镜下活组织病理检查。 1．1．2材料选择 LTS液基细胞学检测试剂盒为珠海市丽拓发展有限公司生产，试剂盒组成均包括细胞收集瓶、标本采 Santa公司。 2方法 2．1标本采集 用无菌棉签擦去受试患者宫颈表面粘液，将LTS标本采集刷插入颈管约lcm，保持适当压力，顺时针 l 旋转5瑚圈，取出细胞刷将刷头放入盛有5mLTS液基细胞保存液中． 113 2．2 LPT液基细胞学技术 保存液中的标本经涡式混匀器振荡混匀5分钟，倒入加有4ml清洁液的离心管内，标记患者信息于管 壁上，离心10分钟，速度为2500r／rain，将上清液倒回细胞保存液瓶内，加2111l细胞处理基液振荡摇匀 后吸50ul滴在玻片上制成直径15mill的薄层涂片，自然干燥后95％乙醇固定、巴氏染色、封片。将细胞 保存液瓶内残液保存在2ml的EP管中做好标记，置于412冰箱，用于提取DNA。 2．3免疫印记法检测宫颈液基细胞残液中HPV16，18的表达 将盛有样本的2ml 取上清，编号，进行蛋白定量，保存在4C冰箱内备用。采用十二烷基硫酸钠一变性聚丙烯酰胺凝胶不连 过夜，洗膜．加二抗(1：2000)孵育2h；DAB显色8min。该膜上有显色带出现为阳性：若无显色带出 现为阴性。 2．4诊断标准 (6)鳞状上皮癌和腺癌。 2．5统计学处理 所得数据采用SPSSl0．10软件进行X2检验。 3结果 3．1 LTS检测结果分析 U’S结果发现正常或炎症患者870例，ASCuS 19例。 3．2细胞学异常患者病理诊断结果 LTS异常的130例患者行阴道镜下多点组织活检，经过病理诊断证正常或炎性反应71例，轻度不典 型增生C咖18例，中度不典型增生CIN 3．3 HPVl6／18感染与病理诊断的关系 N 130例LTS结果异常