贝氏柯克斯体的致病机理与Q热疫苗的研究.pdfVIP

中国人兽共患病学术研讨会论文集 贝氏柯克斯体的致病机理与Q热疫苗的研究 温博海 军事医学科学院微生物流行病研究所 病原微生物生物安全国家重点实验室 析软件对电泳图谱进行分析，总共发现它们之问 贝氏柯克斯体(Coxiellaburnetii，俗称Q热立 克次体)是Q热的病原体。Q热是一种重要的人 的158个差异蛋白。通过基质辅助激光解析／电离 兽共患病，急性Q热主要表现为发热、头痛、肌 串联飞行时间质谱技术和使用Mascot软件将差异 肉酸疼，常伴有肺炎、肝炎等。慢性Q热表现为 表达蛋白的肽指纹图谱在NCBInr的蛋白质数据 长期持续或反复发热，常伴有心内膜炎、慢性肝 库中进行检索，共鉴定出97个差异蛋白，这些蛋 炎、骨髓炎等。贝氏柯克斯体对外界环境的抵抗 白的多数表达为上调。检索相关的文献对这些差 力很强，易于保存和运输，可以气溶胶释放或随 异蛋白的功能进行分析，发现它们分别参与细胞 尘土扩散引起大范围的人兽感染，是一种重要的 的能量代谢、应激反应、细胞骨架运动、蛋白质 潜在生物恐怖剂。贝氏柯克斯体为专性吞噬细胞 和核酸合成代谢等。功能分析结果提示这些蛋白 内寄生菌，研究贝氏柯克斯体与宿主细胞的相互 在单核细胞内的作用多数有利于贝氏柯克斯体在 作用，有助于阐明其致病机理：研发出副作用小 单核细胞内的生长繁殖和感染的建立。进一步研 而免疫效果好的Q热疫苗一直是预防、控制贝氏 究证明这些差异蛋白在贝氏柯克斯体感染时所起 柯克斯体感染课题中的一项最重要内容。 的作用，将为抗贝氏柯克斯体感染的药物和疫苗 一、贝氏柯克斯体的致病机理研究 的研制提供新的思路。 贝氏柯克斯体侵犯的靶细胞主要为单核一巨 噬细胞，单核一巨噬细胞也是它的宿主细胞。贝 二、氯仿一甲醇提取贝氏柯克斯体残存组分 氏柯克斯体侵入单核一巨噬细胞，在吞噬溶酶体 Q热疫苗的研究 内生长繁殖，贝氏柯克斯体的大量繁殖引起吞噬 贝氏柯克斯体对外界环境具有极强的抵抗力 细胞裂解死亡。为了解贝氏柯克斯体感染吞噬细 并可通过呼吸道进入体内引起感染，含贝氏柯克 胞的机理，我们采用体外培养人单核细胞(THPl)斯体的气溶胶及尘土的扩散极易引起Q热大范围 作贝氏柯克斯体的宿主细胞，通过荧光抗体染色 的迅速流行。研制有效的Q热疫苗对易感人群作 和共聚焦显微镜观察，以及测定不『一J时相贝氏柯 预防接种是预防贝氏柯克斯体感染与流行的最有 克斯体在细胞内的量来分析贝氏柯克斯体感染吞 效的措施。从1950年代起美国等国家一直在研制 噬细胞的规律。研究发现人单核细胞对活贝氏柯 Q热疫苗，研制过甲醛和^y线灭活I相贝氏柯克 cell 克斯体的吞噬效率则显著低于对1射线灭活贝氏 斯体全细胞疫苗(wholevaccine，WCV)，虽然 柯克斯体的吞噬，提示活贝氏柯克斯体进入单核 灭活贝氏柯克斯体疫苗的免疫保护有效率几乎为 细胞并非依赖宿主细胞的主动吞噬作用，可能通 100％，但是它们均可引起局部及全身的严重反 过其与宿主细胞相互作用而主动进入宿主细胞 应，包括发热、肝脏损伤、接种部位局部组织脓 内。进入单核细胞内的活贝氏柯克斯体从第4天 肿。1980年代末，美军陆军传染病研究所采用氯 开始，数量逐渐增加，而灭活贝氏柯克斯体进入 仿一甲醇提取I相贝氏柯克斯体，获得的残存组 单核细胞1天后，其量迅速减少，第5天后细胞 分(chlorofo舯一methanol 内贝氏柯克斯体几乎被完全清除。显然，活贝氏