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直接实时分析：升级你的LCMS 　　ASPEC华柏生物科技有限公司的首席技术官 刘春胜 博士 　　首先，ASPEC华柏生物科技有限公司的首席技术官刘春胜博士为大家带来了报告“直接实时分析(Direct Analysis in Real Time，DART?)：升级你的LCMS”。 　　为什么要升级你的LCMS? 　　刘博士以发问的方式开始了他的报告——为什么要升级你的LCMS? 　　LCMS接口技术经历了ESI、APCI、微/纳喷雾等历程，它的理念是快速、简单，至今已被广泛应用于多种应用领域。尽管LCMS具有可定性定量、选择性与专属性(分辨率和质谱精度)高、灵敏度高(可达pg甚至fg级)、响应范围宽、分析速度快、经久耐用、自动化程度高等优点；但也面临着以下挑战： 　　1)溶液状态可能使样本降解、发生反应； 　　2) 需要耗费时间和人力的样品制备过程； 　　3) 存在离子抑制效应，会降低检测降低灵敏度，比如ESI源中无机盐/非挥发性盐对样品信号的严重抑制； 　　4) 需要专家操作(人力成本高)、维护成本高(比如今日的乙睛价格非常高昂，而处理大量的废液也会使成本增加)； 　　5) 分析速度还不够快，通常的LCMS从接样到出结果约需3~4小时，但使用者希望几分钟就可以出结果。 　　明天的生物学对速度的要求，是希望几分钟就能出结果，从而实时地支持临床治疗；而绿色化学的要求，希望耗费小流量的溶剂甚至是——无需溶剂。那么，什么可以做到快速和绿色化学呢？答案是——DART? ！ 　　DART的原理 　　DART?是一种非接触的表面采样技术，用于室温和大气压下的解析电离质谱，是一种“开放式的直接探针”。可以检测分析挥发性或不挥发材料，也可用于分析气体、液体、固体和材料表面。该技术是一种无损耗的分离、离子化和脱附技术，对环境要求不是很苛刻，适合车载和便携式现场检测。 　　DART?于2005年由JEOL(日本电子)和IonSense公司联合商品化，并获得了当年的匹兹堡金奖和RD 100创新大奖。 　　DART?的结构示意图 　　DART?的原理是：载气（第一代DART?为氦气，价格较高；第二代为氮气，可以加热）被引入腔体，在3 ~ 5KV的放电针下产生等离子体，透镜将带电粒子转移，电极栅/气孔可以阻止离子与离子间的二次结合。出来的等离子体打在样品表面，和样品发生能量转移、质子转移、电子捕获等作用，从而产生样品离子后进入质谱，分析过程类似APCI源。整个过程没有暴露的高压，保证了安全性，且在室温下即可操作。使用者也可几分钟拆下自己的ESI源，换上DART。 　　DART的优点和用途 　　刘博士介绍，DART?的优点在于快速即时地离子化固体、液体和气体；无需样品制备；质量范围达2000Da；几乎可以和所有商品化的质谱联用。DART?使得质谱简化，对未知物的分析更容易。DART?不会形成钠、钾的加合物，离子信号更简单直接；DART?也不会产生多电荷离子，不存在离子抑制效应，即使对很脏的尿样也可以分析，即可以分析原型样本。DART?几乎可以和所有商品化的MS联用（除岛津的质谱），如DART?-Waters ZQ、DART?-Thermo LCQ、DART?-API 3000/4000 /100。在灵敏度方面，有人曾试验用DART?与API 3000连接，与API 4000做同一样本的灵敏度接近。 　　DART?目前有几种型号： 　　1) DART?100，这是最早期的DART?产品，具备最基础的DART?功能； 　　2) DART?-ET，该技术加大了样品分析的空间，满足样品量大和来源多样性的要求； 　　3) DART?SVP，该技术09年刚推出，是一种用iPOD touch操控的智能化技术，可以全面操控DART源的各种参数和分析过程；并可从网站下载各种参考方法、样品谱库，可适用于便携分析场合。 　　另外，DART?还可使用分析大量样品的Auto DART?-96、化学噪音更低的Dip-it?采样技术、可以捕获更多气化离子的Vapur?技术，其中Vapur专利技术，可以把DART产生的离子通过长距离的传输线传入质谱，并保证信号灵敏度，对于安检、法医、应急检测非常有用。 　　刘博士举例了DART?分析的多种应用，包括药品、代谢组学、爆炸物、有机合成和有机代谢、食品和饮品、毒性工业材料、杀虫剂、低聚糖、包装和聚合物，总之，除了蛋白质的所有物质均可用DART?分析（注：蛋白等可用DESI源，但DESI源目前尚没有成熟的商品化仪器）。与LC相比，DART?的条件更简单，过程控制更能反映真实情况。DART?最重要的特点就是可对LC无法分析的膏状物、糖浆以及尼龙样、胶水、粘合剂等高聚物进行分析，虽然裂解质谱也可以分析高聚物，但DART?对样本是没有损耗的。