(用)专题2课题3分解纤维素的微生物的分离.ppt

* 目标： 如何分离土壤中能分解纤维素的微生物 　　阅读课本27页基础知识部分第一、二段，回答下列问题： 1. 纤维素在生物圈的分布状况？ 　　纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 一、纤维素和纤维素酶 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、 CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 2.纤维素酶的组成及作用？ 3、纤维素的分解 能分解纤维素的微生物有各种细菌、真菌和少数放线菌。 方法：滤纸崩溃法 4、纤维素酶活性的测定实验： 下列生物能分解纤维素的是（ ） ①人 ②兔 ③牛 ④蘑菇 ⑤纤维杆菌 A.①②③④⑤ B.②③⑤ C.②③④⑤ D.③⑤ C （二）纤维素分解菌的筛选 1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 阅读课本课本28页相关部分，回答下列问题： 2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通过____________来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 刚果红染色法：　　这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选 练一练： 1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是 A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 2.利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是 A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛　选出了纤维素分解菌 三、实验操作 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 〖旁栏思考题〗本实验流程与课题2中的实验流程有哪些异同？ 课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，直接分离得到菌落 本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖以后，再将菌液涂布到选择培养基上。 土壤取样 ①取样环境 富含纤维素的环境中 由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 ②原因 土壤取样 ③实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。 ④讨论:如果找不到合适的环境，可将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应埋进土壤中多深？ 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。 〖旁栏思考题〗为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？ 在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高 〖旁栏思考题〗将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？ 人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。 ?1.选择培养的目的： 　　增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物 选择培养 　　参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题 a.旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？ b.这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？ 是液体培养基，原因是配方中无凝固剂 有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖 ?2.制备选择培养基 c.你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用 用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照 ?3.操作方法： 　　将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养 　　思考：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 　　在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用 梯度稀释 　　按照课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数到106 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1. 制备培养基: