植物非细胞凋亡体系的构建.docVIP

植物非细胞凋亡体系的构建/qikan/periodical.articles/kxtb/kxtb99/kxtb9911/991112.htm 周　军　陈浩明　朱海珍　戴尧仁* (清华大学生物科学与技术系，北京 100084. *联系人) 摘要　为了研究植物细胞的凋亡机制，利用热激诱导凋亡的烟草细胞中的胞质溶胶，构建了植物非细胞凋亡体系.　温育在此体系中的正常烟草细胞核，出现染色质固缩、形成凋亡小体等典型的细胞凋亡的形态学特征，DNA电泳分析观察到核小体间DNA断裂所形成的梯状条带，将细胞核进行彗星电泳观测到彗星状的核DNA片段的迁移.　抑制剂研究发现，pepstatin A，leupeptin及EDTA均不能抑制上述形态学变化及生化变化，而iodoacetamide却能起到部分抑制作用，这与在动物细胞凋亡过程中发挥作用的Caspases的抑制模式十分吻合，表明与Caspases类似的半胱氨酸蛋白酶可能参与了植物细胞的凋亡过程.　关键词　细胞凋亡　非细胞体系　蛋白酶　蛋白酶抑制剂 　　细胞凋亡(apoptosis)是细胞在内外界刺激的作用下由基因调控的主动连续的程序化死亡过程.　凋亡在细胞的分化，生物体自稳平衡的维持及多种病理过程中具有重要作用，在动物中已经得到较为充分的研究［1，2］.　Lazebnik等人［3］和Nicholson等人［4］利用非细胞体系确定Caspase-3在