17不同波长光照对草履虫增殖的影响及其感光蛋白基因克隆的初步探究.pdfVIP

四川动物2009年 第28卷第6期 SichuanJourn~ofZoology Vo1．28 No．6 2009 不同波长光照对草履虫增殖的影响及其感光蛋 白 基因克隆的初步探究 彭铎，张博钧 (武汉大学生命科学学院，武汉 430072) 摘要：目的 研究不同波长光照对草履虫增殖的影响，克隆草履虫感光蛋白基因。方法 以双小核草履虫 卜 ameciumaureli为研究对象，分别置于黄色光 (578～592nm)、蓝色光(446—464nm)、红色光 (620～760nm)、白光和 自然光下，每隔1h随机抽样法显微观察并计数；RT—PCR克隆草履虫感光蛋白基因。结果 不同波长光的照射下， 与 自然光比较，第 1天黄光组草履虫增殖显著上升 (P0．01)，蓝光组和红光组草履虫增殖受到不同程度的抑制(P 0．0l，P0．05)，白光组无明显差异(P0．05)；第2天，蓝光组、红光组和白光组草履虫增殖仍受到抑制 (P 0．01)，黄光组作用不显著(P0．05)。黄光组和白光组草履虫总 RNA作为模板，克隆出大小约500bp的rhodop— sin—like基因cDNA片段，5个不同光照组均克隆出大小约 195bp的Longwavesensitiveopsin-like基因cDNA片段。 结论 黄色光显著地促进草履虫增殖，蓝色光和红色光抑制其增殖；黄光和白光能诱导草履虫rhodopsin—like基因表 达；Longwavesensitiveopsin—like基因在草履虫有表达。 关键词：草履虫；增殖；不同波长的光照；类视紫红质；长波视敏蛋 白类似物 中图分类号：Q959．117；Q7 文献标识码：A 文章编号：1000—7083(2009)06—0821—06 EffectsofDifferentW ave-length Illuminationon theReproductionRateof Paramecium aureliandtheCloningofPotentialPhotosensitiveGenes PENGDHO，ZHANGBo-jun (CollegeofLifeSciences，WuhanUniversity，Wuhan430072，China) Abstract：Objective ToinvestigatetheeffectofdifferentwavelengthsoflightonthereproductionrateofParamecium aureli．Toclonegenesencodingpossiblephotosensitivereceptorproteins．M ethods ReproductionofParame cium aureli wasstudiedunderdifferentilluminationconditions：yellowlight(wavelength578—592nm)，bluelight(wavelength446 ～ 446 nm)，redlight(wavelength620～760nm)，whitelight，andshadedsunlight．Sampleswereextractedrandomly from eachgroupeveryhourandthethequantitycountedunderamicroscope．RT—PCR wasemployedtoclonegeneseneo— dingpossiblephotosensitivereceptorproteins．Results Underlightofdifferentwavelengths，paramecium intheyellowlight grouppropagatedfastestandshowedgreatdiscrepancycomparedtoother