生化综合实验报告--测定蛋白质含量三种方法及其比较.docVIP

本科学生综合性实验报告 学号 姓名 学院 专业、班级 实验课程名称 测定蛋白质含量的三种方法及其比较 教师及职称 开课学期 至学年 学期 填报时间 年 月 日 云南师范大学教务处编印 实验序号 十~十二 实验名称 测定蛋白质含量的三种方法及其比较 实验时间 2012/11/16~2012/11/30 实验室 睿智楼3幢331（生物技术实验室4） 1．实验目的： ⑴掌握双缩脲法定量测定蛋白质含量的原理和方法。 ⑵掌握考马斯亮蓝法定量测定蛋白质含量的原理和方法。 ?⑶掌握紫外吸收法定量测定蛋白质含量的原理和方法。 ⑷比较三种定量测定方法的异同。 2． 实验原理、实验流程或装置示意图 （1）双缩脲法 (Biuret 法)测定蛋白质浓度 原理：在碱性溶液中，双缩脲(H2N-CO-NH-CO-NH2)与Cu2+作用形成紫红色的络合物，这一反应称双缩脲反应。具有两个或两个以上肽键的化合物都有双缩脲反应，因此蛋白质在碱性溶液中，也能与Cu2+形成紫红色络合物，颜色深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用比色法测定蛋白质的浓度。 在一定条件下，未知样品的溶液与标准蛋白质溶液同时反应，并于540nm下比色，可以通过标准蛋白质的标准曲线求出未知样品