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ChinaBiotechnology, 2009, 29(4): 39~ 45
Oct4*
1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2** 1, 2
王 芳 杜庆安 朱宛宛 吴 迪 徐艳玲 关云谦 张 愚
( 1 100053 2 100053)
目的:探讨在分化扩增期采用连续低密度传代的方法是否能降低小鼠胚胎干细 向神经
细 分化的前体细 中Oct4阳性细 的比例, 以及对神经分化能力的影响方法: 采用五步
法将小鼠胚胎干细 向神经元分化, 进入扩增期后采用连续低密度传代的方法连续传 10代
然后应用细 免疫组化鉴定Oct4阳性细 神经元与胶质细 流式细 仪检测Oct4阳性细
比例凋亡试剂盒测定细 凋亡结果:流式细 仪检测出扩增期连续低密度传代得到的前体细
中Oct4阳性细 的比例由 16. 17 4. 8 降至 4. 33 1. 63 , 扩增期低密度传代细 和正常高
密度传代细 的细 凋亡率鉴定分别为 15. 163. 64 和 11. 882. 63 ,步骤 5诱导分化后的
细 GFAP和Tuj1免疫组化染色呈阴性结论:低密度传代培养可以减少分化后Oct4阳性细
的比例,且该比例下降不是由Oct4阳性细 的凋亡引起的同时可能是因为低密度传代培养
和高密度相比引起了细 的质变或者改变了前体细 向神经元分化的某种微环境, 导致了前体
细 不能分化为神经细 提示高密度培养在前体细 向神经元分化过程中具有重要作用, 高
密度和低密度培养的比较,提供了研究 ES细 向神经元分化机制的新平台和研究方向
胚胎干细 细 培养 神经分化
Q254
( bFGF),
, ( embryonic stem cel,l ,,
ES) ,; ,
[1, 2] 3 4,
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[3] , Oct4
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ITSF( insulin, transferrin, sodium selenium, fibronectin) ES
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* 973 ( 2006CB0F0603, 20
2007CB947700)(H020220010290) ,,
** ,: guanyunqian@ yahoo. com. cn
ES,
40 China Biotechnology Vol. 29No. 4 2009
10ng/ml ( bFGF) ( RD
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