青蒿琥酯联合骨髓间充质干细胞移植 [兼容模式].pdfVIP

•南京军区医学科技创新经费资助重点项目(11Z012) 青蒿琥酯联合骨髓间充质干细胞青蒿琥酯联合骨髓间充质干细胞 移植对移植对移植对移植对肝肝纤维化的治疗作用纤维化的治疗作用纤维化的治疗作用纤维化的治疗作用研研究究究究 解放军第解放军第123123医院医院 丁体龙丁体龙 研究背景研究背景研究背景研究背景 肝纤维化治疗 11. 原发病的病因治疗原发病的病因治疗((抗病毒抗病毒、抗血吸虫抗血吸虫、 戒酒等) 2. 针对肝星状细胞的治疗(抑制HSC增殖： 干扰素干扰素、S-腺苷蛋氨酸等腺苷蛋氨酸等；；促进促进HSC凋凋 亡：胶霉毒素、姜黄素等) 3. 降解胶原降解胶原、消炎消炎、保肝等综合治疗保肝等综合治疗 4.肝移植(最有效，但供体缺乏、创伤大、移 植排斥植排斥、、价格昂贵价格昂贵、、远期存活率低远期存活率低)) 5.细胞移植(来源广泛、创伤小、可重复、费 用相对较低用相对较低)) 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,cells, MSC)MSC)是最具有潜力的供体细胞是最具有潜力的供体细胞，，具具 有多向分化潜能，已被证实具有抗纤维化 的作用的作用。 体外研究证实，MSC可分化为肝干细胞， 具有肝细胞的特征(合成糖原、分泌白蛋白 等等)) 另有研究得到否定的结论另有研究得到否定的结论：未能找到未能找到MSCMSC 分化为肝细胞的证据，甚至发现其向成纤 维细胞转化维细胞转化，促进了肝纤维化的发生发展促进了肝纤维化的发生发展。 决定MSC分化方向的最重要因素肝脏干 细胞生存微环境细胞生存微环境(niche)。 干细胞干细胞niche的组成的组成：肝内基质细胞肝内基质细胞((肝星状肝星状 细胞、Kupffer细胞、肝窦内皮细胞)、基质 细胞分泌的可溶性因子细胞分泌的可溶性因子((生长因子生长因子、、趋化因趋化因 子、炎症因子等)、胞外基质(纤维连接蛋白、 胶原胶原、、层粘连蛋白层粘连蛋白、、蛋白多糖等蛋白多糖等))及神经系及神经系 统。 青蒿琥酯是我国学者从黄花蒿中提取的青蒿琥酯是我国学者从黄花蒿中提取的一 种含内过氧化物基团的倍半萜内酯化合物， 具有抗疟具有抗疟、免疫抑制免疫抑制、抗病毒及抗肿瘤等抗病毒及抗肿瘤等 多方面的药理作用，其抗纤维化作用是近 年来才被发现的另一重大药理作用，且无 明显的不良反应明显的不良反应。。 促进促进HSCHSC向肝向肝 青蒿琥酯 改善肝脏微环境 细胞转化 增强青蒿琥酯抗增强青蒿琥酯抗 改善肝脏功能 肝纤维化效果 ?? 1.1.1.1.材料与方法材料与方法材料与方法材料与方法 材料与方法材料与方法材料与方法材料与方法 材料：实验动物：SD大鼠120只，雌雄不限，2 月龄，体质量（200 ±20 ）g,购自上海斯莱克实 验动物有限责任公司验动物有限责任公司，机构许可证号机构许可证号： SCXK(沪)：2003-0003，实验室常规饲养，光照 和暗适应各和暗适应各12h/d12h/d，一周以后用于实验周以后用于实验； MASSON三色染色试剂盒：上海杰美基因医药 科技有限公司科技有限公司；；TGFTGF-ββ11和和TNFTNF-ααELISAELISA试剂盒试剂盒：： 武汉博士德生物科技有限公司产品；RNAiso Plus抽提试剂及DL2000 DNA Marker为TaKaRa 公司产品，PCR 逆转录试剂为AMV公司产品， PCR引物由上海生工生物工程公司合成。 SDSDSDSD 大鼠肝脏纤维化模型的构建大鼠肝脏纤维化模型的构建大鼠肝脏纤维化模型