顾娜--抗肿瘤原位凝胶系统生物学评价.pdfVIP

抗肿瘤原位凝胶系统的生物学评价 1 2 顾娜 ，胡人杰 1. 2. （天津医科大学研究生院 天津 300072 ； 天津市医药科学研究所 天津 300072 ） 摘 要：在肿瘤治疗的研究中，局部给药系统因其能够在局部形成较高的药物浓度并可 降低系统化疗引起的毒、副作用而正在稳步发展，其中原位凝胶系统凭借其独特的优势日益 受到药物研发人员者的青睐。本文综合介绍了目前原位水凝胶及其载药系统在抗肿瘤研究中 的进展。包括：原位水凝胶体系的细胞毒性、凝胶系统对肿瘤生长的影响、载药凝胶系统体 内、体外药效学评价等，最后讨论了未来的技术改进及发展方向。 关键词：原位凝胶；载药凝胶系统；肿瘤；治疗 1 原位凝胶及载药凝胶系统的特点 原位凝胶又称即型凝胶，将其以溶液状态给药后，能够立即在用药部位发生相转变，成 为半固体的凝胶状态。与传统的给药系统相比，原位凝胶有着显著的优点：(1)随接触环境 的改变发生物理或化学的变化，因此可调整制剂的理化性状(如相转变程度等) 以及药物在体 内的状态(如释放、滞留等) 以适应病情的及时有效治疗；(2)能较长时间地和用药部位紧密接 触，有较好的生物黏附性，从而提高生物利用度；(3)三维网状结构高度亲水，可将所载的 药物束缚于其中或者间隙中，控制药物释放；(4)组织相容性好，使用方便，减少了给药频 率，提高了患者的顺应性；(5)具有特殊的理化性能，在体外条件下，具有一定的流动性， 易灌装，便于工业化生产[1] 。原位凝胶按聚合物种类不同可分为壳聚糖类、泊洛沙姆类、聚 乙二醇嵌段共聚物（PEG ）类和其他如聚N一异丙基丙烯酰胺(PNIPA)类凝胶等[1] 。原位凝胶 [2] [3] [4] [5] 可以通过多种途径给药，如口服 、注射、滴眼 、鼻腔粘膜给药 、直肠粘膜给药 、阴 [6] [7] 道粘膜给药 、经皮给药 等，因此其被广泛应用于抗肿瘤药物、抗感染药物、调节免疫功 能的药物、蛋白质及多肽类大分子药物的研究及临床应用中[8] 。本文着重介绍注射用原位凝 胶系统在抗肿瘤研究方面的现状。 2 凝胶系统的生物活性 2.1 细胞毒性的观察 目前研究较多的原位凝胶是壳聚糖凝胶系统，这是因为壳聚糖是一种对人体安全并且含 有碱基基团的天然产物，其能抵抗微生物、有较好的生物相容性、可生物降解性以及黏膜可 1 [9,10] 粘附性等 。通常情况下，细胞表面占优势的是负电荷，它们对带有碱性集团的基质如壳 聚糖具有粘附作用，已有报道成纤维细胞能够在胶原-壳聚糖混合膜上生长[11]，上皮细胞在 壳聚糖薄膜上生长[12]等. [13]，将初始含量为5000个/孔的 光敏交联型壳聚糖（Az-CH-LA ）凝胶体外细胞毒性试验 成纤维细胞、冠状平滑肌细胞、冠状内皮细胞加入96孔板培养5小时后三种细胞均贴壁，加 入100ul不同浓度的Az-CH-LA溶液孵育2天，最后加入WST-1反应试剂450nm测OD值，结果 显示随着Az-CH-LA浓度的增高三种细胞的粘附贴壁能力逐渐减弱，但不影响这些细胞的分 裂增殖；此外发现这些细胞通常生长在凝胶的旁边，该实验证实Az-CH-LA水溶液及凝胶对 上述三种细胞无毒性。Az-CH-LA体内试验将不同浓度的Az-CH-LA溶液给予C57BL/6小鼠腹 腔注射，Az-CH-LA凝胶皮下注射于小鼠的背部皮下组织，并且在小鼠背部做1cm切口植入 200ul 30mg/ml 的Az-CH-LA凝胶溶液，最后尼龙线缝合切口，结果显示小鼠可存活一个月； 小鼠背部移植的凝胶在10-14天时部分发生生物降解，一个月后移植部位肉眼已无法检测到 壳聚糖凝胶。另外，有实验显示Az-CH-LA水溶液及其凝胶无致突变性和细胞毒性[14]，这说 明凝胶本身作为药用是安全的。 还有人通过体外几种细胞系的试验及体内动物实验，观察了几种脱乙酰程度不等的（从