热应激反应对中性粒细胞NADPH氧化酶活性及呼吸爆发功能的影响.pdfVIP

东 南 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) 2 　2007 , Nov; 26 ( 6) : 430 43 3 ·43 0 · J South eastUn iv (M ed Sci E di ) 热 应 激 反 应 对 中 性 粒 细 胞 NADPH 氧 化 酶 活 性 及 呼 吸 爆 发 功 能 的 影 响 1 1 2 2 缪丽君 ,应玲 ,王蓓蓓 ,秦洪云 ( 1. 上海市第八人民医院 康复科 ,上海 　200235 ; 2. 东南大学附属 中大医院 康复科 ,江苏 南京 　210009) [摘要 ] 目的 :观察体外诱导热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响 。方法 :将健康人中性粒细胞分成 3份 , 1份作 为对照组 ,其余 2 份应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液共 同孵育 ,并分别作为热休克组 、氯化镉组 。各组 ( n = 1 ) ( ) 于热应激反应诱导后 0、2、3、4、6 h分别测定中性粒细胞 热休克蛋白 H SP 70 的表达 、NADPH 氧化酶活性及呼吸爆发功能 。结 果 :热休克与氯化镉均 可诱 导热应激反应 ,细胞 内 H SP70表达增加 ;热应激反应抑制中性粒细胞 NAD PH 氧化酶 活性并降低 其 呼吸爆发功能 。结论 :热应激反应通 过抑制中性粒细胞 NADPH 氧化酶活性减少 O - 释放 ,提示热应激反应可能参与机体的抗 2 炎作用机制 。 [关键词 ] 中性粒细胞 ; NAD PH 氧化酶 ;热应激反应 ; 呼吸爆发 2 2 2 [中图分类号 ] R594. 1　　 [文献标识码 ] A 　　[文章编号 ] 167 1 62 64 ( 2007) 06 0430 04 μ ( ) ( 　　炎症反应过程 中 , 中性粒细胞 NADPH 氧化酶活 与含量后 ,取 RNA 5 g用逆转录 R T 试剂盒 晶美 化催化生成并释放 O- ,发挥抗感染的同时也损伤 自身 生物制品公司 ) 制备 cDNA 。 2 组织 。多种伤害性因素如创伤 、感染等会 引起 中性粒细 1. 2. 2　PCR 扩增反应 　取一定量 的模板 DNA 应用 胞释放大量 O - 而诱发过度炎症反应及器官损害 [ 1 ] 。 PCR 试剂盒 (晶美 生物制 品公司 ) , 分别扩增 H SP70 2 2 热应激反应是机体面对不良因素时的生理反应 ,此过程 基因中 36 bp 的片段和 βactin 基 因中 27 0 bp 的片 ( )