冷诱导抗冻肽植物表达载体构建和转基因烟草检测.pdfVIP

冷诱导抗均：肚植物表选载体的构i墼和转麟埘烟草的榆测 冷诱导抗冻肽植物表达载体的构建和转基因烟草的检测 中文摘要 本文就本室谢秀杰、朱晔荣构建的诱导型表达抗冻肽八联体基因及组成型表达 抗冻肽四联体基因用农杆菌介导法转基因烟草，并对筛选到的卡那霉素抗性植株分别 进行不同的检测。对前者，因为谢秀杰构建的诱导型表达的抗冻肽八联体基因是与 GUS报告基因融合表达的，所以我主要是对GUS报告基因进行了活性检测。通过荧 光光度分析法检测，得到转基因植株的GUS表达活性明显高于对照植株：通过组织 化学法检测。观察到GUS融合基因在转基因植株茎横切面维管束附近细胞间隙分泌 表达，在叶片的徒手切片细胞组织中也有表达，出现许多蓝色斑点。所以可以认为与 GUS基因融合表达的抗冻肽基因同样在转基因植株中表达，而且是组织特异性分泌 blot 表达。对后者，转组成型表达抗冻肽四联体基因的烟草植株，我进行了Southern 分析，基本上检测到外源基因已整合到烟草基因组DNA中，还可以对转基因植株做 进一步的检测。 根据近几年冷诱导基因及其表达调控