【最新】猪流感抗体间接ELISA检测方法的建立【原创精品】---厌食.pdfVIP

维普资讯 第29卷 第4期 中 国 预 防 兽 医 学 报 VO1．29．No．4 2007 年 4 月 ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicine Apr．2007 猪流感抗体间接 ELlSA检测方法的建立 陈 艳，辛晓光，杨焕 良，李 婷，李海燕，乔传玲，陈化兰 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 农业部动物流感重点开放实验室 ／兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150001) 摘 要：猪流感病毒A／Swine／Fujian／668／2001(H3N2)株感染的鸡胚尿 囊液，经差速 离心后 ，再经蔗糖 密 度梯度 离心，提纯、纯化的猪流感病毒经NP-40处理并反复冻融，作为猪流感间接 ELISA抗原 ，确立了间接 ELISA检测方法。对 29份 HI试验猪流感为阴性的血清进行 了检测，经统计学分析，确定间接 ELISA判定标 准，被检血清 oD 值 ≥0．20判定为阳性。该方法对猪瘟等 l1种猪疫病阳性血清无交叉反应，批 内和批 间重 复试验 的吸收变异系数分别在 3．34％～8．12％和 6．2％～9．04％之 间。与 HI的符合率达到 92．8％，经卡方检 验 (P0．01) 比HI试验敏感 。为猪流感抗体检测提供 了快速 、准确、简便 的方法。 关键词：猪流感；猪流感病毒；间接 ELISA 中图分类号 ：$852．659．5；$854．44 文献标识码 ：B 文章编号 2007)04．0308．04 EstablishmentofanindirectELISA fordetectionofantibodies againstswine influenzavirus CHEN Yah，XIN Xiao—guang，YANG Huan—liang，LITing， LIHai-yan，QIAOChuan-ling，CHENHua．1an (AnimalInfluenzaLaboratoryofMinistryofAgriculture，NationalKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechIlology，HaIbin VeterinaryResearchInstituteofChineseAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150001，China) Abstract：AnindirectEUSAf0rdetectingantibodiesaganistswinenifluenzavirus(sty、wasdevelopedusnignatigenthat wasderivedfrom allnatoicfluidofchickenembryonatedeggsnifectedwithA／SwnieF／ujian／668／2001fH3N2)．Theantigenwas purifide bydifferentialcenlrifugationna dsucrosedensitygradientcenlrifugation followedbyNP-40treatmentnad3 freezethaw ， cycles．Sampleswiht anopticaldnesiyt value≥0．2werescoredpositivebasedonhteEUSA datafrom twenyt．nineserahtatare knownSⅣ ne