第三章RNA的转录.pptVIP

本章主要内容 一、 RNA的转录 二、启动子与转录起始 三、终止与抗终止 四、 mRNA的特征与比较 五、转录后修饰 复制和转录的异同点 相同点：1.都以DNA为模板 2.原料为核苷酸 3.合成方向均为5′→3′方向 4.都需要依赖DNA的聚合酶 5.遵守碱基互补配对规律 6.产物为多聚核苷酸链 不同点： 复制 转录 模板 两股链均作为模板 模板链作为模板 原料 dNTP NTP 聚合酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 子代DNA双链 mRNA;tRNA;rRN 配对 A-T；G-C A-U；T-A；G-C ★ 引物 需RNA引物 -------- ★方式(特点) 半保留复制 不对称转录 引言 1、RNA的结构与种类 结构：ATP－UTP　 　　　　GTP－CTP 大分子结构：单链 　　　　　　双螺旋区 　　　　　　三叶草结构 种类：mRNA rRNA tRNA 转录：以DNA为模板合成与DNA链序列完全相　　　　　　　　　　同（T－U除外）的RNA单链的过程。 主要步骤：起始、延伸、终止等 DNA分子双链的划分： 　　 编码链：不作复制模板的DNA单链，又称有义链 模板链：作复制模板的DNA单链，又称反义链 一、 RNA的转录 　以DNA为模板合成RNA的过程称为转录（transcription）。转录是生物界RNA合成的主要方式，是遗传信息朋DNA向RNA传递过程，也是基因表达的开始（图17-1）。转录也是一种酶促的核苷酸聚合过程，所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP）。转录产生初级转录物为RNA前体（RNa precursor），它们必须经过加工过程变为成熟的RNA，才能表现其生物活性。 1、转录的基本过程 转录的主要过程见图，为研究和叙述方便，可将RNA合成分为模板识别、转录起始、通过启动子及转录延长和终止四个阶段。 模板识别：RNA聚合酶与启动子DNA作用并与之结合。在DNA形成转录泡。 通过启动子：转录起始后直到9个核苷酸短链 转录延长： RNA聚合酶离开启动子，沿DNA链移动并产生新RNA链伸长。 终止：不再形成磷酸二酯键，RNA－DNA分离，转录泡瓦解，DNA恢复双链。 RNA酶促合成的特点： 　（1）合成原料为ATP、GTP、CTP、UTP 　（2）的RNA在NDA模板上以RNA聚合酶酶促合成 　（3）只有一条DNA链作为一个基因的RNA模板，这可用人工分子杂交试验证实。 　（4）RNA链按照5‘－3’方向（DNA链的3‘－5’）定向合成，因此RNA5‘端为三磷酸键。 2、转录机器的主要成分 （1）依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP） 真核和原核细胞内都存在有DDRP，迄今发现的DDRP的有以下特点： ①以DNA为模板；在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板（模板链），所以这种转录方式又叫做不对称转录。 ③都遵循DNA与RNA之间的碱基配对原由，A=U，T=A，C=G，合成与模板DNA序列互补的RNA链。 ④RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。 ⑤需要Mg2+或Mn2+离子。 ⑥并不需要引物。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性，所以没有校正功能。 RNA聚合酶催化下列反应： RNA聚合酶的作用： 　（1） RNA聚合酶与DNA分子结合并识别DNA分子上的起始信号（全酶专一地与DNA启动子序列结合） 　　　RNA聚合酶的δ因子是识别启动子序列的主要因子，不同的δ因子使RNA聚合酶识别不同的启动子序列 　（2） RNA聚合酶使DNA双链由封闭型复合体转变为开放性复合体，使DNA局部解螺旋。 　（3）催化磷酸二酯键形成，使RNA链延长 　（4）识别DNA上的终止子序列，使RNA合成终止。 大肠杆菌RNA聚合酶的研究得比较透彻的，这是一个分子量达50多万，全酶由五个亚基组成，去掉δ亚基的部分称为核心酶，核心酶本身就能催化苷酸间磷酸二酸键形成。利福平和利福霉素能结合在β亚基上而对此酶发生强烈的抑制作用。β亚基似乎是酶和核苷酸底物结合的部位。细胞内转录是在DNA特定的起始点上开始的，δ亚基的功能是辨认转录起始点的。β’亚基是酶与DNA模板结合的主要成分。α亚基可能与转录基因的类