中药指纹图谱线性梯度分离条件快速优化方法.pdfVIP

第 35卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究报告 第 6期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2007年 6月 Ch ine se Jou rnal of A nalytical Chem istry 839 ～844 中药指纹图谱的线性梯度分离条件的快速优化方法 尹小英 　姚卫峰 　胡育筑 (中国药科大学分析教研室 ,南京 2 10009) 摘 　要 　提出了一种复杂样品线性梯度分离条件的快速优化方法 。先通过 4 次线性梯度的初始实验 ,然后利 用 Excel规划求解工具获得准确的溶质保留方程系数 。在此基础上利用网格搜索完成线性梯度的参数优化 。 整个优化策略通过对中药金银花提取液中各组分的分离得以验证 。同时比较了网格搜索 、遗传算法 、遗传算 法与规划求解联用的 3种寻优算法 。结果表明: 3种方法优化结果接近 ,但运算时间有所差异 。 关键词 　中药 ,指纹图谱 ,线性梯度 ,优化 1　引　言 梯度分离条件的优化一直是液相色谱领域研究的热点和难点 。对于线性梯度的优化 , 国内外文献 报道的方法很多 ,但适合于中药指纹图谱的优化方法却很少 。计算机辅助优化法 ,如 D rylab 软件包主 要应用于二元流动相的梯度优化 [ 1, 2 ] ,但当流动相中加入酸 、碱 、盐后预测偏差大 ;单纯形优化法也应用 [ 3 ] ( 于梯度的优化 ,但需要较多次实验 ;常用的 Q SRR 模型 quan titative structu re reten tion relation sh ip mod el) , 即利用化合物结构及其理化性质优化法 ,适用于已知结构的组分的分离 [ 4 ] 。本研究旨在建立一个 适合于中药指纹图谱线性梯度分离的快速优化方法 , 即通过较少次实验以实现复杂组分的最优分离 。 首先 ,运行 4 个线性梯度的初始实验以获取溶质保留方程系数 ,这是优化的基础 ;其次 ,选择恰当的优化 指标 ,运用网格搜索完成寻优过程 。最后 ,结合混合重复优化方法 ,进一步校正方程系数 , 以获得更优的 分离及更好的预测精度 。中药金银花提取液中各组分的良好分离证实了优化策略的可行性 。 2　梯度分离条件快速优化的算法 2. 1　选择优化参数并确定优化范围 影响色谱分离的因素很多 ,如色谱柱 、流动相组成 、柱温等 ,这些参数可以参照文献 [ 5 ]确定 。但另 一些参数如起始浓度 、洗脱时间及最终浓度等是影响色谱分离的主要因素 ,需要进一步的优化 。对于线 性梯度来说确定这 3个参数即可确定一个线性梯度的条件 。故本研究梯度条件的优化即选择对起始浓 度 ,洗脱时间及最终浓度 3个参数进行优化 。通过一次预实验将强溶剂从 0%到 100%变化将全部组分 洗脱出来 , 3个参数的优化区域可以初步确定 ,得起始浓度 B ,洗脱时间 t 及最终浓度 B 的优化区域 0 G i 分别为 10% ～22 %和 34 ～60 m in , 36% ～72 % 。 2. 2　设计初始实验计算保留系数 进行初始实验是为了获得溶质在优化范围内的保留规律 。从理论上说运行两次线性梯度可以获得 各组分的保留系数 。但为了确保系数的准确性 ,设计 4 次初始实验 。初始实验点的构建可以在优化区 域内适当组合 3个参数 ,但应使最后的强保留组分完全洗脱出来 。 进行梯度条件优化的关键是能够准确地预测溶质的保留时间。实验选用卢佩章等 [ 6 ] 提出的线性 ( ) 保留时间预测公式来预测溶质的保留时间。公式 4 中的保留系数 a、c测定的精度决定了保留时间的