CD80联合CD28／CpG ODN活化的PBMC对胃癌细胞杀伤作用的实验研究.pdfVIP

实用 医药杂志 2010年 03月 第 27卷 第 03期 PracJMed Pharm．Vol27。2010-03No．03 基础研究 · 论 著 · CD80联合 CD28／CpGODN活化的 PBMC对 胃癌细胞杀伤作用的实验研究 方 军，郭树军，李永研 f摘 要1 目的 研究 CD80和 CD28／CpGODN(含CPG的核脱氧核苷酸)活化单个核细胞 (PBMC)在体外对 胃癌细胞株 MKN 杀伤作用机理，为胃癌的过继免疫治疗可能性提供参考 。方法 外周血 PBMC的分离与体外培 养 ．共刺激活化外周血PBMC，用含共刺激活化 PBMc或／和 CD800．4mg／L的 lO0ml，L胎牛血清的RPMI1640培养 基培养细胞 ，测生长曲线 ；MT]r法检测活化细胞 的体外淋 巴细胞毒作用 ，并用 电镜观察效应细胞杀伤的 胃癌细胞超 微结构及用流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡指数。结果 CD80本身对 胃癌细胞株 MKN 有一定的杀伤作用(P O．05)，CD28／CpG ODN共刺激活化 PBMC在体外对 胃癌细胞株 MKN 杀伤作用 明显 (P0．01)，CD80与 CD28／ CpGODN共刺激活化 PBMC合用，对 胃癌细胞株 MKN 的杀伤作用显著大于 CD80本身对 胃癌细胞株MKN 杀伤 作川 (P0．01)，亦大于单独应用 CD28C／pGODN共刺激活化 PBMC对 胃癌细胞株 MKN 的杀伤作用 (PO．05)，CD80 增加 了胃癌细胞株 MKN 对共刺激活化 PBMC的敏感性 。电镜结果显示 ，效应细胞作用 24h肿瘤细胞就部分发生 坏死 ，部分肿瘤细胞可见凋亡。流式细胞仪检测效应细胞 胃癌细胞株 MKN 72h明显凋亡。结论 CD80与共刺激 活化 PBMC合用 ，提高了CD28C／pGODN活化 PBMC对 胃癌细胞株 MKN 的靶向性杀伤作用。单抗协同诱导的效应 细胞对胃癌细胞株MKN 杀伤效果较好 ，以上二者合用较单用任何一种处理对 胃癌细胞株 MKN 杀伤作用更强 ， 而坏死细胞进一步增 多说明效直细胞是通过诱导肿瘤细胞坏死及细胞凋亡两条途径来实现杀伤作用，从而说 明活 化的淋 巴细胞杀伤 胃癌细胞是通过坏死及凋亡实现的。 f关键词fPBMC；单克隆抗体 ；胃癌 f中图分类号1 R567．2 f文献标识码1A Killing efficacy of PBM C costimulately activated by CD28／CpGODN combined with CD80 on the gastriccancerouscell：Experimentalstudy FANGJun，GUOSHu-jnn，LIYong-yan．Dept．ofGeneralSurgery， No．153 Hospita1．ZHengzhou，Henan 450042．China A【bstractJ 0bjective ToinvestigatekillingeffectofPBMccostimulatelyactivatedbyCD28C／pGODNby CD28 and CpGODN McAb combined with CD80 on human gastric cancerous cel11ine in vitro．M etbod The cancercellswere cultured with PBMC and CD28／CpGODN MoAb and CDS0．then the growth CHIVe ofcellswas obtained．The killing efficiency wasmeasured byMTF method．The submicroscopic structure ofcellswasobserved by electron microscope．Apoptosis was verified by a flow eytometer．Resuit After treated with costi