利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430构建含cry1Ac10基因的解离载体.pdfVIP

利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430构建含cry1Ac10基因的解离载体.pdf

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利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430构建含cry1Ac10基因的解离载体.pdf

卷 期 微 生 物 学 报 .% # OC@J.% GCJ# 年 月 +%%% !#$%’()(*($,-$ PQ-9 +%%% + 利用苏云金芽胞杆菌转座子 构建含 ,-..#% 基因的解离载体! ! $$!$% # 吴 岚 孙 明 喻子牛 (华中农业大学微生物科学技术系 农业微生物农业部重点实验室 武汉 ) .#%%(% 摘 要:将 基因和苏云金芽胞杆菌的复制起始区连接在一起,并在其两侧按相同 !$$!$% # 方向各连接一个来自苏云金芽胞杆菌转座子,-..#%的解离位点,构成转移单位。再将革兰 氏阳性细菌的抗性标记基因和大肠杆菌克隆载体 与之连接,获得含 基因的 01$’ !$$!$% / # 解离载体 。将其转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变体,再导入含解离酶基因的辅助 232!%$ / 质粒 。在解离酶作用下,两个解离位点间发生重组,消除基在操作中的抗性标记 232$+%% / 基因等非必需基因片段,获得仅保留有完整 基因和来自苏云金芽胞杆菌质粒复制 !$$!$% # 起始区,在无抗生素选择压力下能稳定遗传的重组质粒 。 232!%$2 / 关键词:苏云金芽胞杆菌,位点特异性解离,解离载体,杀虫晶体蛋白基因 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) 4!$+ 5 %%%$)+%’ +%%% %#)%+.)’ 7 苏云金芽胞杆菌( , )是一种革兰氏阳性( )能形成芽胞的 %!’(()*+,)’-’/-*’* %+ 6 . 杆状细菌,在芽孢形成期合成的杀虫晶体蛋白( )对多种农业害 89:;=?@1A:;?@8AC;9-:

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