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利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430构建含cry1Ac10基因的解离载体.pdf
卷 期 微 生 物 学 报
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年 月
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利用苏云金芽胞杆菌转座子 构建含
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基因的解离载体!
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吴 岚 孙 明 喻子牛
(华中农业大学微生物科学技术系 农业微生物农业部重点实验室 武汉 )
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摘 要:将 基因和苏云金芽胞杆菌的复制起始区连接在一起,并在其两侧按相同
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#
方向各连接一个来自苏云金芽胞杆菌转座子,-..#%的解离位点,构成转移单位。再将革兰
氏阳性细菌的抗性标记基因和大肠杆菌克隆载体 与之连接,获得含 基因的
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解离载体 。将其转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变体,再导入含解离酶基因的辅助
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质粒 。在解离酶作用下,两个解离位点间发生重组,消除基在操作中的抗性标记
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/
基因等非必需基因片段,获得仅保留有完整 基因和来自苏云金芽胞杆菌质粒复制
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#
起始区,在无抗生素选择压力下能稳定遗传的重组质粒 。
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关键词:苏云金芽胞杆菌,位点特异性解离,解离载体,杀虫晶体蛋白基因
中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( )
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7
苏云金芽胞杆菌( , )是一种革兰氏阳性( )能形成芽胞的
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杆状细菌,在芽孢形成期合成的杀虫晶体蛋白( )对多种农业害
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