利用雙管柱膠滲透法以最少時間、最少溶劑使用量，將脂質去除.pdfVIP

吉偉儀器第 007期電子報 .tw 利用雙管柱膠滲透法以最少時間、最少溶劑 使用量， 將脂質去除負載量最大化 目前 USEPA凝膠滲透層析淨化方法中(USEPA方法3640A)要求每個樣品處理需要 300mL的二氯甲烷， 且對於注射5mL至傳統GPC淨化管柱所建議的最大脂質 去除量為1克 。傳統的GPC淨化方法需大量 的含氯溶劑 來淨化每個獨立的樣品。此項研究說明雙管柱GPC結合替代管柱和溶劑能有效的在最小 化或停止使用含氯溶劑的同時脂質的 去除為最大化。 實驗 儀器由J2 Scientific PrepLincTM 系統所組成，包含 GPC-MAXX淨化模組和AccuVap內建濃縮模組 。 使用的管柱類型如下 ： 管柱的組合 管柱 1 管柱 2 CO100 100％二氯甲烷 傳統二氯甲烷 (Dichloromethane 傳統管柱(CO100 100% Dichloromethane Traditional) Traditional Column) 二氯甲烷快速傳統/ CO100100％二氯甲烷 CO775 100％二氯甲烷快速管柱(CO775 (Dichloromethane 傳統管柱(CO100 100% Dichloromethane 100% Dichloromethane Express Column ) Express/Traditional) Traditional Column ) 50:50 乙酸乙酯：環己烷快速/快 CO785 50:50 乙酸乙酯：環己烷快速管柱 CO78550:50 乙酸乙酯：環己烷快速管柱 速(50:50 Ethyl (CO785 50:50 Ethyl Acetate:Cyclohexane (CO785 50:50 Ethyl Acetate:Cyclohexane Acetate:Cyclohexane Express Column) Express Column) Express/Express) 70:30 乙酸乙酯：環己烷(70:30 CO795 70:30 乙酸乙酯：環己烷快速管柱 70:30 乙酸乙酯：環己烷 Ethyl Acetate:Cyclohexane (CO795 70:30 Ethyl Acetate:Cyclohexane 傳統管柱(70:30 Ethyl Acetate:Cyclohexane Express/Traditional) Express Column) Traditional Column ) 雙管柱 GPC依據USEPA 方法3640A先通過最初管柱，之 後依順序通過兩個管柱進行管柱校正來設置。最初分離 時間是 以來自第一個管柱的大部份脂質所需時間來設定。 在此時，將第二個管柱切換至內部聯結。當一個大量的 脂質負載進入至GPC-MAXX 系統，主要的脂質部份 (Dump 1)在第二個管柱切換至內部聯結前已被分離為廢 棄物。因而減少進入第二管柱 (Dump 2)的脂質量負載至 易於管理的程度。剩餘的脂質在分析物收集前於第二次 分離部份去除。 結論 結合使用DCM的快速管柱與傳統管柱，使各層級測試產生良好的脂質去除率，並可 去除高達 5克 的脂質 。使用雙管柱方法的優勢為：用少於25%的時間達到相同的結果並且不 需使用含氯溶