响应面设计法优化蕨渣基质的灵芝培养条件.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（１２）：３７～４２ 响应面设计法优化蕨渣基质的灵芝培养条件 １，２ １ ２ ２ 余有贵 　李忠海 　黄国华 　陈彩琼 （１中南林业科技大学　长沙　４１０００４　２邵阳学院　邵阳　４２２０００） 摘要　探索灵芝在以蕨渣为主要成分的固态基质中的培养条件，可为蕨渣的开发利用提供理论 依据。以蕨渣为主要原料，采用响应面法对灵芝培养条件（基质蕨渣比例、基质含水量和培养温 度）进行优化。结果表明，基质蕨渣比例、基质含水量和培养温度对灵芝菌丝日平均生长速率均 有极显著的影响（ｐ＜０．０１），且基质含水量与培养温度之间、基质蕨渣比例与基质含水量之间存 在交互作用。优化出灵芝培养条件为蕨渣比例８５％，基质含水量６２．５％，培养温度２７℃，在此条 件下，灵芝菌丝日平均生长速率为３．４８ｍｍ／ｄ。多元回归分析结果显示，基质蕨渣比例、基质含水 量、培养温度与菌丝日平均生长速率之间回归模型高度显著，可用于实际生产预测。首次报道了 利用蕨渣培养灵芝，为蕨渣进一步的开发研究奠定基础。 关键词　蕨渣　灵芝　培养条件　生长速率　响应面法 中图分类号　Ｑ９３－３３５ 　　蕨（ＰｔｅｒｉｄｉｕｍＡｑｕｉｌｉｎｕｍｖａｒ．ｌａｔｉｕｓｃｕｌｕｍＵｎｄｅｒｗ．） 间的交互影响规律等优势［１４，１５］。本研究以蕨渣为主要 为蕨科 Ｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ蕨属 Ｐｔｅｒｉｄｉｕｍ，别名如意菜、狼萁 原料，在单因素实验的基础上，采用响应面法对灵芝培 ［１］ 等 。蕨根因含３５％ ～４５％淀粉而被提取蕨粉，蕨粉 养条件进行优化，旨在为蕨渣的开发利用提供理论依 ［２，３］ 据，从而提高资源的利用率，丰富药用真菌的营养源。 产品成为内销和出口创汇的重要土特产 ，然而，蕨 根提取淀粉后的蕨渣常被弃之不用。 １　材料与方法 　　灵芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ）为担子菌纲，多孔菌目， ［４，５］ １．１　材　料 多孔菌科，灵芝属，是我国著名的食（药）用真菌 ，含 ［６～９］ １．１．１　菌种　灵芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（ｌｅｙｓｓ：Ｆｒ．） 有多种氨基酸、活性多糖等营养和功能成分 。灵芝 属异养真菌，主要营养是碳素、氮素和无机盐，能在含 Ｋａｒｓｔ］ＧＬ１０，购自广东省微生物研究所微生物菌种保 有纤维素、半纤维素和木质素的基质上生长，多以棉籽 藏中心。 壳、阔叶树椴木或锯木屑、玉米秸秆等作为培养基主要 １．１．２　蕨渣　采 自邵阳市近郊的鲜蕨（Ｐｔｅｒｉｄｉｕｍ 成分进行人工栽培［１０～１３］，这些培养基中，椴木或木屑受 Ａｑｕｉｌｉｎｕｍｖａｒ．ｌａｔｉｕｓｃｕｌｕｍＵｎｄｅｒｗ．）根，洗净表面泥沙， 到了资源的限制，棉籽壳、玉米秸秆等农副产品的农药 破碎、搓洗去淀粉，收集的蕨渣经沥水、低温烘干、粉碎 残留、重金属等安全问题遭到质疑。因此，寻找资源丰 后，获得过８０目筛的蕨渣样品。 富、安全可靠的代用原料成为食用菌栽培的热点，但未 １．１．３　麸皮　购自邵阳市农贸市场。 见利用蕨渣栽培灵芝的报道。 １．１．４　培养基　马铃薯２００ｇ（去皮，煮汁，取滤液），葡 萄糖 １５ｇ，蛋白胨 ５ｇ，ＫＨＰＯ ０．５ｇ，（ＮＨ）ＨＰＯ 　　响应曲面法是一种解决多变量问题的一种统计学 ２ ４ ４ ２ ４ 方法，目前已广泛应用于农业、生物、食品、化学、制造 ０．２５ｇ，ＭｇＳＯ０．１５ｇ，ＣａＣｌ０．５ｇ，Ｖ ０．０１