转植酸酶基因海水小球藻生理生化的初步研究.pdfVIP

第 20 卷第 3 期 烟台大学学报 (自然科学与工程版 ) Vol. 2 0 N o. 3 2007 年 7 月 Jou rna l o f Yan tai U n iversity (N a tural Science and En ginee ring Edition) Ju l. 2007 　　文章编号 : 004 - 8820 ( 2007) 0 3 - 0 77 - 06 转 植 酸 酶 基 因 海 水 小 球 藻 生 理 生 化 的 初 步 研 究 郑旭龙 ,王长海 , 2 ( . 大连 理工大学 生命科学与工程系 ,辽宁 大连 6024; 2. 烟台大学 海洋学院 , 山东 烟台 264 005) 摘 　要 : 从 4 2个转植酸酶基因小球藻单克隆藻株中筛选出植酸酶产量较高的 8个株藻 , 经过 7次传代 ,各藻株 的植酸酶活保持在稳定的状态 ,证实植酸酶基 因在小球藻中获得 了 稳定表达. 对转基 因小球藻所产生植酸酶 的性质进行了初步研究 ,结果表明此酶最适作用 pH 值为 3. 8和 6. 0 ,最适作用温度为 6 5 ℃. 在相 同培养条件下 ,转基 因藻与未转基 因藻 生理指标并无明显差异 ,说 明外源植酸酶基因的转入对小球藻 的生长及生理指标无明显 影响. 关键词 : 小球藻 ;植酸酶 ;基因 ;表达 中图分类号 : : Q 5 　　　　文献标识码 : A 　　植酸及其盐类是植物磷 的主要储存形式 [ ] . 同时 ,可提供更全面 的营养 ,一举两得 ,这无疑是 植酸酶能将植酸 降解为肌醇和无机磷酸 ,它作为 植酸酶应用的最佳方法 ,具有广 阔的开发前景和 新型单胃动物饲料添加剂 ,可使植物饲料 中磷 的 潜在 的经济价值. 利用 率 提 高 60 % , 动 物粪 便 中磷 排 泄 量 减 少 40 % ,并可 以降低植酸的抗营养作用 [ 2 - 3 ] , 既提高 　材料与方法 养殖业生产效益又降低环境磷污染. 天然材料 中 . 　藻种 植酸酶含量很低 ,大规模生产难 ,抗逆性不能满足 ( ) 小球藻 Ch lorella sp. MACC /C95 购 自中国 饲料及饲料加工要求 ,植酸酶基 因工程研究为解 海洋大学微藻种质 ,经本实验室分离纯化除菌. 决这些问题提供了一种途径 [ 4 - 6 ] . [ 9 ] 转基 因小球藻 :本实验室获得 . ( ) 海水小球藻 Ch lo rella sp. MACC / C95 培养 . 2　培养基 条件简单 ,大规模培养成本低 ;体积相对较小 ,结 μ VB 0. 6 mg/L , VB . 0 g /L , KNO 0. 5 g/L , 构简 单 ,便于基 因表达产 物的提取 ; 作为真核藻