细胞膜穿透肽促进脂质体包载的 siRNA细胞内转运、定位及其功能.pdfVIP

1·42 · 药学学报 A cta Pharm aceu tica Sin ica 2006, 4 1 (2) : 142 - 148 细胞膜穿透肽促进脂质体包载的 siRNA 细胞内转运 、定位及其功能 1, 3 1 1 1, 2 1 3 13 王 　薇 , 唐 　宁 , 张春玲 , 刘兴君 , 胡 　菡 , 张志翔 , 梁 　伟 ( 1. 中国科学院 生物物理研究所 , 生物大分子国家重点实验室 , 北京 100 10 1; 2. 沈阳药科大学 药学院 , 辽宁 沈阳 110016; 3. 北京林业大学 生物科学与技术学院 , 北京 100083) ( ) 摘要 : 目的　研究细胞膜穿透性寡肽 ———八聚精氨酸 R 8 输送包载 siRNA 的脂质体进入细胞能力的促进作 用 。方法 　将合成的 R 8与 PEG2PE形成偶联物并定向定量地插入包载 siRNA 脂质体的外层膜上制成 R 82lipo som al siRNA 。荧光分光光度计测定脂质体 中 R 8 的含量 , 荧光倒置显微镜观察 R 8 修饰 的脂质体与常用转染试剂 lipofectam ine 2000携带 siRNA 对小细胞肺癌 NC I2H446 的转染效果 ,M TT法检测 R 82lipo som al siRNA 对 NC I2H446 细 胞的生长抑制作用 。结果 　R 8未修饰的脂质体不能穿过细胞膜 ,而 R 8修饰的脂质体则能迅速进入细胞内,随着作 用时间的延长逐渐定位在细胞浆和细胞核 。R 8修饰的脂质体介导 hdm22siRNA 转染肿瘤细胞的效率和对肿瘤细胞 的生长抑制作用明显强于 lipofectam ine 2000。结论 　R 8修饰的脂质体可以有效输送 siRNA 进入细胞并增强其生物 学功能 。 关键词 : 细胞膜穿透性寡肽 ; 八聚精氨酸 ; 脂质体 ; 小分子干扰 RNA ; 细胞内摄取 中图分类号 : R943. 4　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 0513 - 4870 (2006) 02 - 0142 - 07 Cell penetra ting peptides enhance in tracellular tran sloca tion and function of siRNA encapsula ted in PEGyla ted liposom es 1, 3 1 1 1, 2 1 WAN G W ei , TAN G N ing , ZHAN G Chun2ling , L IU X ing2jun , HU H an , 3 13 ZHAN G Zh i2xiang , L IAN G W ei ( 1. N a tiona l L abora tory of B iom acrom olecu les, Institu te of B iop hy s ics, Ch inese A cadem y o