H2O2对骨骼肌ryanodine受体的氧化作用.pdfVIP

维普资讯 第30卷第4期 长春理工大学学报 (自然科学版) VO1．30 No．4 2007年12月 JournalofChangchunUniversityofScienceandTechnology{NaturalScienceEdition) Dec．2007 H2O2对骨骼肌ryanodine受体的氧化作用 王清爽，夏冰，于源华 (长春理工大学 生命科学技术学院，长春 13oo22) 摘 要：Ryanodine受体 (RyR)是肌质网快速释放 ca的通道，在细胞钙信号转导及相关生理过程如肌细胞的兴 奋一收缩偶联过程中扮演重要角色。SDS—PAGE和免疫印迹实验结果显示H：O能够氧化SR膜上的RyR1，使其560一 kDa单体和416-kDa内源性酶解片段的强度降低直至消失，并产生三个高分子量复合物。加入还原剂二巯基乙醇， 能够抵消这种氧化作用。 关键词：骨骼肌 ryanodine受体；胰蛋 白酶；过氧化氢 中图分类号：Q51 文献标识码：A 文章编号：1672—9870(2007)04—0066—03 TheOxidization From H202totheSkletalM uscle RyanodineReceptor WANGQingshuang，XIABing，YUYuanhua (SchoolofLfieScience，ChangchunUniversityofScienceandTechnologyChangchun，130022) Abstract：Ryanodinereceptor(RyR)isthefastCa releasechannelofthesarcoplasmicreticulumandplaysavitalrole inCa signalingandexcitation—conrtactioncouplingnimusclecells．UpontreatmentofsarcoplasmicreticulumwithH2O：． SDS—PAGEshowedhtathteintensityofhte565一kDaRyR1peptidednadits410-kDaendogenousenzymaticfragment(fRyR) wasdramaticallyreduced，nadinparallel，threehigh—molecular-weightbna dswereobserved．Western blottingna alysis revealedthatthesehigh—moleculra-weightbnadswerecross—linkedRyRsubunits．ThechemicalchnagesofRyR1wererevev sibleuponreductionbyreducingagent2-mercaptoethnao1． Keywords：skeletalrynaodinereceptor(RyR1)；trypsin；hydrogenperoxide(H2O2) RyR1的每个亚基含有 100个半胱氨酸残基 …， 子物质有N．乙基．马来酰亚胺(N．ethylmaleimide)， 其中大约 50个残基在 RyR1天然状态时处于还原 联氨(diamide)，谷胱甘肽(glutathione)，一氧化氮 态 ]。如果氧化其中的 15个还原态半胱氨酸残 (nitricoxide，NO)，过氧化氢(hydrogenperoxide， 基，可以引起RyR1通道的活化，但继续氧化 10个 HO)等。其中，谷胱甘肽、NO和H：O：是内源性的 还原态残基则导致通道的抑制 ¨]。最近的研究已经 物质，其它都是外源性的物质。HO 氧化调节 明确了RyR1的七个高反应性半胱氨酸残基，分别