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不同的植物叶片对水葫芦链格孢Ae09菌株生长的影响 葛慈斌，刘波，朱育菁，蓝江林 （福建省农业科学院生物技术研究所生物农药研究中心，福建 福州 350003） 摘要：比较了水葫芦链格孢Ae09菌株在未灭菌和灭菌的水葫芦、茄子、豇豆和大蒜叶片汁液-琼脂平板上的生长状况。结果表明，水葫芦叶片不会比豇豆和茄子提供更多的营养物质供水葫芦链格孢生长，Ae09菌株在未灭菌的水葫芦、茄子、豇豆叶片汁液-琼脂平板上培养8 d后，产生的孢子数分别为3.3×104、4.0×104和4.5×104 cfu/ml，前者比后二者少；在灭菌的水葫芦、茄子、豇豆叶片汁液-琼脂平板上，产生的孢子数分别为2.1×104、5.2×104和5.5×104 cfu/ml，前者仍比后二者少；Ae09菌株在灭菌后的豇豆、茄子和大蒜叶片汁液-琼脂平板上产生的孢子数均比未灭菌的相应平板上的孢子数多，但在未灭菌的水葫芦叶片汁液-琼脂平板上产生的孢子数比在灭菌后的平板上产生的孢子数多，提示水葫芦叶片可能存在能够促进水葫芦链格孢生长的某些物质，但高压灭菌处理会使该物质失去活性，而茄子、豇豆和大蒜叶片不存在这些物质。 关键词：水葫芦链格孢；营养；孢子数 中图分类号： 文献标识码： 水葫芦(Eichhornia crassipes Mart. Solms)，又名凤眼莲、凤眼兰，属雨久花科凤眼莲属，是一种漂浮水面(或泥地)生长的大草本。水葫芦主要以匍匐根繁殖，速度极快，在适宜条件下，每5-6d就繁殖一新的植株[1]。水葫芦一旦在新的传入地定居，常在短时间内侵占邻近水域，形成单一植物群落，是目前世界上危害最为严重的多年生水生杂草之一。我省的水葫芦危害情况也很严重，许多河道和湖泊也被水葫芦覆盖。对水葫芦的防除，目前主要靠打捞和使用化学除草剂的方法，但也存在着效果不理想[2]或污染水质等问题。水葫芦链格孢（Alternaria eichhorniae）是研究较早的水葫芦病原真菌，对水葫芦具有较强的侵染能力，但基本不侵染其他的植物，即具有较强的寄主专一性[3]。为从营养方面来探索水葫芦链格孢的这种寄主专一性，本研究选取水葫芦、茄子、豇豆和大蒜的叶片，研磨成浆后与琼脂混合制成平板，观察水葫芦链格孢在这些平板上的生长状况，分析这些叶片对其生长的影响，现将结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 菌株和培养基 水葫芦链格孢Ae09菌株，由中国农科院环发所万方浩研究员馈赠；马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基。 1.2 不同植物叶片汁液琼脂平板的制备 选取新鲜的水葫芦、茄子、豇豆和大蒜的叶片各0.6 g，用研钵研磨成浆后，加水定容至60 ml，装于150 ml的三角瓶，再加入1.0g的琼脂，微波炉加热煮沸，稍冷却后，倒平板（Ф=8.8 cm）。 配制同样的4种植物叶片汁液-琼脂溶液各60 ml一份，120 ℃高压灭菌20 m后倒平板。 1.3 水葫芦链格孢的培养 在长满Ae09菌株菌丝的PDA平板上，用打孔器打取菌片（Ф=0.6 cm），接种1片到不同植物叶片汁液-琼脂平板中央，置28 ℃培养箱培养；分别以1.8%琼脂为空白对照，以PDA培养基为正常营养的对照；各类植物及对照均设3个重复。 2.4 菌落直径和孢子浓度的测量 培养4 d和8 d后，观察各平板上的菌落生长状况，用“十”字测量法测量各平板上的菌落直径；培养8 收稿日期：2006- 作者简介：葛慈斌（1973-），男，助理研究员，研究方向：生物防治 *通讯作者：刘波，博士、研究员，e-mail：laeptb@163.com10 ml无菌水覆盖平板表面，收集孢子悬液，用血球计数板测各悬液的孢子数。 2 结果与分析 2.1 Ae09菌株在未灭菌的不同植物叶片汁液-琼脂平板上的生长状况 试验结果见表1。水葫芦链格孢Ae09菌株在未灭菌的不同植物叶片汁液-琼脂平板上培养4 d后，各菌株菌落直径的大小存在差异。水葫芦叶片汁液-琼脂平板上的菌落直径为7.38cm，略微地比茄子和大蒜叶片汁液-琼脂平板上的菌落直径6.95和6.81 cm大，但显著地大于豇豆叶片-琼脂平板上的菌落直径（6.53 cm）；空白琼脂平板上的直径为4.16 cm，显著地比含有植物叶片汁液平板上的菌落直径小（P 0.01）。培养8 d后，除空白琼脂平板上的菌落直径为6.34 cm外，其它平板上的菌落长满整个平板，菌落直径为8.80 cm。豇豆和茄子叶片汁液-琼脂平板收集的孢子数分别为4.5×104和4.0×104 cfu/ml，显著地比水葫芦平板的孢子数（3.3×104 cfu/ml）大（P 0.01）×104 cfu/ml。 表1 水葫芦链格孢Ae09菌株在未灭菌的不同植物叶片汁液-琼脂平板上的菌落直径和孢子