月日,权乐乐,何首乌生品及不同炮制品大黄素含量的测定分析,.docVIP

何首乌生品及不同炮制品大黄素含量的测定分析 【摘要】目的 对何首乌生品及不同炮制品大黄素含量的测定结果进行分析探讨，为今后的临床应用提供可靠的参考依据。方法 以2010年版《中国药典》和《本草纲目》中方法对何首乌进行炮制，经高效液相色谱法对何首乌生品以及不同炮制方法获得的水提液、醇提液中大黄素含量进行测定，并对测定结果进行对比分析。结果 何首乌生品中大黄素含量最高（P0.05），九蒸九晒组含量最低（P0.05）。结论 不同炮制方法制得的何首乌中大黄素含量存在一定差异，何首乌生品中大黄素含量最高，临床应用过程中应引起重视。 【关键词】 何首乌 生品 炮制 大黄素 高效液相色谱法 何首乌中大黄素为主要毒性成分，因此在炮制过程中应注意减少大黄素含量，以达到降低何首乌毒性的效果[1]。本次研究中出于对何首乌生品及不同炮制品大黄素含量的测定结果进行分析探讨的目的，采取高效液相色谱法对何首乌生品和不同炮制品中大黄素含量展开了测定，并对测定结果进行了对比分析，现汇报如下。 1 材料与方法 所需仪器我实验室应用的高效液相色谱仪，TGL-16G离心机，所需试剂均为分析纯。实验试药包括何首乌干燥块根。 2 数据处理 研究中相关数据资料采用SPSS18.0统计学软件处理，相关计量资料采用均数加减标准差（±s）形式表示，对比中计量资料的对比采取t检验，计数资料的对比则是采取Χ2检验，在P＜0.05时，视为差异存在统计学意义。 3 方法与结果 3.1 何首乌的炮制 以2010年版《中国药典》和《本草纲目》中方法对何首乌进行炮制[2]。 3.2 大黄素含量测定 3.2.1 何首乌水提物的制备[3] 取何首乌生品以及不同炮制品饮片各30g，采取煎煮方式进行提取，第一次加水量为8倍量，提取时间为1小时，第二次煎煮加水量为6倍量，提取时间为1小时，合并两次提取液，经水浴蒸干，真空条件下进行干燥，制得何首乌水提物，保存备用。 3.2.1.1 何首乌醇提物供试溶液制备[4] 取上述制得的何首乌生品及不同炮制品水提物粉末，精密称定0.2g，将其放置在锥形瓶中，精密加入25ml的甲醇，称重后水浴回流1小时，放冷后称重，经甲醇对损失重量进行不足，摇匀后过滤，取续滤液作为游离型蒽醌供试品溶液。 3.2.2 何首乌醇提物供试溶液制备 取何首乌生品以及不同炮制品，将其制成细粉，过4号筛，精密称定0.5g，放置在锥形瓶中，精密加入25ml甲醇，称重后水浴回流1小时，放冷后称重，经甲醇对损伤重量予以补足，摇匀后过滤，取续滤液作为游离型蒽醌类供试品溶液。 3.2.3 对照品溶液配制 精密称定大黄素标准品适量，经甲醇溶解后制成浓度分别为0.0605mg/ml的大黄素标准溶液。 3.2.4 色谱条件 色谱柱为Diamosil C18柱，规格为4.6×250mm，5um。流动相为甲醇-0.1%磷酸（85:15），流速为1.0ml/min，波长为254nm，柱温为室温，进样量为10ul。 3.2.5 方法学考察 经线性关系考察得到线性回归方程为Y=46406X-15524，r=0.9998，大黄素对照品进样量在0.121-0.726ug范围内存在良好线性关系；精密度实验结果为，大黄素峰面积RSD值为0.56%，精密度良好；稳定性实验结果为，供试品溶液在12小时内具有良好稳定性；重现性实验结果为：供试品溶液峰面积RSD值为1.38%，重现性良好。 3.2.6 样品测定 经对比发现，何首乌生品中大黄素含量最高（P0.05），何首乌九蒸九晒组大黄素含量最低（P0.05），详见表1。 表1 何首乌生品及不同炮制品水提物与醇提物大黄素含量测定结果比较 水提物 醇提物 炮制方法 大黄素含量（%） 炮制方法 大黄素含量（%） 何首乌生品组 0.09 生首乌生品组 0.24 清蒸剂量组 0.10 清蒸剂量组 0.19 黑豆汁制首乌组 0.09 黑豆汁制首乌组 0.14# 何首乌九蒸九晒组 0.03# 何首乌九蒸九晒组 0.11# 注：#与何首乌生品组比较差异显著（P0.05） 4 讨论 何首乌为中药领域中应用较为广泛的一种药材，在诸多的保健食品、补血类中成药中均将制首乌作为主药成分[5]。近几年关于何首乌引起不良反应的报告逐渐增多，多表现为肝脏损伤，目前何首乌临床应用安全性已经受到了广大医学工作者和患者的重视[6-7]。现阶段在中药炮制研究中，关于降低何首乌中毒性成分大黄素含量的研究逐渐增多，本次研究中通过对比发现，不同的炮制方法得到的炮制品中大黄素含量存在一定的差异，何首乌生品中大黄素含量最高，九蒸九晒炮制组中大黄素含量最低，这一结果与相关文献报道结果一致[8]，证实了有效的炮制手段可达到降低何首乌毒性的作用，减少大黄素等毒性成分的含量，为