急性淋巴细胞白血病细胞肿瘤相关糖抗原前体的丁酰化改造.pdfVIP

国际医药卫生导报 2010年 第 16卷 第 O6期 IMHGN，March2010，Yo1．16 No．06 急性淋巴细胞白血病细胞肿瘤相关糖抗原 前体的丁酰化改造 熊伟 朱美华 陈盛强 徐飞华 【摘要】 目的 探讨急性淋巴细胞 白血病细胞肿瘤相关糖抗原前体的丁酰化改造。方法 采用化学方法合成新前体N一丁酰甘露糖胺。结果 核磁共振氢谱证明新前体为N一丁酰甘露 糖胺。结论 通过新前体N一丁酰甘露糖胺的合成，实现对急性淋巴细胞白血病细胞肿瘤相关 糖抗原前体的丁酰化改造，为进一步通过细胞生物工程方法合成免疫原性显著增强的新肿瘤相 关糖抗原N—T酰唾液酸 、解决AIJI_J患者免疫治疗时免疫耐受问题打下了基础。 【关键词】 肿瘤相关糖抗原 ；N一丁酰甘露糖胺 ；合成 急性淋巴细胞 白血病(acutelymphoblastic 氯化钠配制而成；丁酰氯溶液200 l加入二氯甲 leukemia，ALL)是常见的恶性肿瘤。近年来 ，尽 烷溶液中，定溶到200ml，配成 1mg／ml的丁酰 管新的抗白血病药物不断出现、新的化疗方案不断 氯一二氯甲烷使用液。 改进和骨髓移植 bonemarrowtransplantation，BMT) 1．2 主要实验仪器 磁力搅拌器为德国IKA公司产 的开展，但国内儿童ALL的五年无病生存率只有 品，型号为C—MAG MS7。柱色谱用硅胶HG／ 60％～70％；成人仅有20％～30％【“。因此，对ALL T2354—92为青岛海洋化工有限公司产品。 患者在联合化疗及BMT~b寻找安全而有效的治疗方 1-3 N一丁酰甘露糖胺的合成和纯化 取431．2mg 法意义重大。免疫治疗南于其安全性 、有效性及 盐酸甘露糖胺置于5Oml茄形瓶中，加入 甲醇 l0 靶向性而被认为是肿瘤治疗的理想方法I2_31。 ml、甲醇钠甲醇液3．8ml，在冰水浴中磁力搅拌 肿瘤相关糖抗原是肿瘤相关抗原中表达最为丰 使之完全溶解，并缓慢滴加1mg／mlT酰氯二氯甲烷 富、最为暴露者 ，为设计肿瘤疫苗的重要靶点。 溶液2ml，继续搅拌4h。减压使溶剂蒸发后，将残 但在动物和人体均存在对天然肿瘤相关糖抗原如N一 留物柱层析纯化后得白色粉末状同体，即为新化合 乙酰唾液酸等的免疫耐受，而N一乙酰唾液酸是由 物。 其前体N一乙酰甘露糖胺在细胞内表达的。因此 ， 1．4 新化合物的鉴定 经核磁共振氢谱(HNMR)对 本研究拟通过化学方法合成N一丁酰甘露糖胺 ，以 新合成产物进行鉴定。 实现对急性淋巴细胞白血病细胞肿瘤相关糖抗原前 2 结果 体的丁酰化改造 ，为将来以这些新合成的前体作为 新化合物经HNMR鉴定 ，该化合物有 l7个H， 细胞糖基化修饰反应的前体 ，通过白血病细胞中特 与N一丁酰甘露糖胺所含H原子相符合；经重水交 定酶的作用，使白血病细胞表达具有很强免疫原性 换后HNMR较前减少了5个H原子；此外，在HNMR 的新肿瘤相关糖抗原，以解决ALL患者免疫治疗 高场方向相应的化学位移处可见一个甲基和一个亚 中存在的免疫耐受问题。 甲基，显示丁酰基已进入甘露糖胺中，证明新化合 1 材料与方法 物为N一丁酰甘露糖胺。 1．1 主要试剂和配制 盐酸甘露糖胺 、甲醇钠 、 3 讨论 二氯甲烷 、丁酰氯均为美周Sigma公司产品。0． 急性淋巴细胞白血病是小儿常见的恶性肿瘤， 6mmol／L甲醇钠甲醇溶液由甲醇液溶50ml溶解0．69g 占儿童白血病的75％。虽经多年努力，国内儿童ALL 的五年无病生存率仍只有60％～70％，治疗效果仍 急待提高。目前正方兴未艾的免疫疗法可能成为 DOI：10．3760／cma．J．issn．1007—1245．2010．06．003 ALI治疗的新希望。 基金项 目：广东省医学科研基金立项课题(A2006299) 然而，要对ALL患者进行免疫治疗，关键就 作者单位：5l0260 广州医学院第二附属医院