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针刺对2 型糖尿病大鼠肝组织IRS-1mRNA 的影响1
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刘志诚,袁爱红 ,龚美蓉,谢莉
南京中医药大学第二临床医学院,南京(210029 )
E-mail :yuanah2004@
摘 要:目的:探讨针刺对2 型糖尿病大鼠肝组织胰岛素受体底物 1 (IRS-1 )基因表达的
影响及针刺与优降糖对2 型糖尿病大鼠肝组织IRS-1 基因表达的比较。方法:SD 雄性大鼠
100 只,经高脂饲料喂养成肥胖大鼠(50 只),腹腔注射小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,
STZ )(25mg/kg )造模成2 型糖尿病大鼠(18 只),随机分为针刺组、药物组(优降糖)
和模型组,处理4 周后,用快速血糖仪检测空腹血糖(FBS)、用放免法检测空腹胰岛素(FINS) 、
用实时定量荧光PCR (real-time RT PCR )法检测肝组织IRS-1 的基因表达,并与正常组大
鼠进行对照。结果:针刺组和药物组FBS 水平比模型组显著降低(P0.05 ),接近正常组
水平(P0.05 );针刺组FINS 明显低于模型组(P0.05 ),接近正常组水平(P0.05 ),药物
组FINS 水平亦低于模型组,但无显著差异(P0.05 );模型组IRS-1mRNA 相对含量是正
常组的25%;针刺组IRS-1mRNA 相对含量为正常组的2.83 倍;药物组IRS-1mRNA 相对含
量为正常组的1.23 倍。结论:针刺和优降糖均可上调2 型糖尿病大鼠肝组织IRS-1mRNA 的
表达,针刺对2 型糖尿病大鼠肝组织IRS-1mRNA 表达的上调作用优于优降糖。
关键词:2 型糖尿病;IRS-1mRNA;real-time RT PCR 法;针刺
1. 引言
随着经济的发展、人们生活方式的改变以及社会人口老年化,2 型糖尿病(T DM )的
2
发病率逐年增加。T2DM 以胰岛素抵抗(Insulin-resistance,IR )和胰岛素(Insulin,INS)分泌的
相对缺乏为特征。目前研究认为胰岛素受体底物 1 (insulin receptor substrate 1,IRS-1 )的表
达可能与具有 T2DM 家族史的患者密切相关,IRS-1 表达不足或者磷酸化异常可导致胰岛素
抵抗[1、2] 。针灸治疗T DM 由来已久,并显示了良好的疗效。许多学者从多方面对针刺治疗
2
T DM 的机理进行了研究,并取得了很大的成绩。为了探讨针刺治疗 T DM 对肝组织
2 2
IRS-1mRNA 表达的影响,我们采用实时 real-time RT PCR 法检测技术对实验性 T2DM 大鼠
肝组织 IRS-1mRNA 的表达进行了观察。
2. 材料和方法
实验动物为刚断乳的 SD 雄性大鼠,平均体重 50g 左右,共 100 只,由上海实验动物中
心提供。
2.1 2 型糖尿病大鼠模型研制
将刚断乳的 SD 雄性大鼠随机分为两组,一组用普通饲料喂养 16 周,为普通饲料组(20
只),另一组用自配高脂饲料喂养 16 周,为高脂饲料组(80 只),饲料配方见表 1。造模
方法:所有大鼠在造模期间自由摄食、饮水,饲料和水每日更换 1 次。观察方法:定时观察
大鼠的体重(W )、体长(H )、LEE 氏指数(W/H2 )。喂养 16 周以后,高脂饲料组中,
体重高于普通饲料组平均体重 20 %的,为单纯性肥胖大鼠(60 只)。给肥胖大鼠腹腔注射
小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)(25mg/kg ),高脂饲料继续喂养一周后,禁食
过夜,用罗氏活力型血糖仪测空腹血糖,空腹血糖高于 7mmol/L 的即为T2DM 大鼠。
1本课题得到高等学校博士学科点
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