双启动子对重组溶源性枯草杆菌中外源蛋白表达增强作用.pdfVIP

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2017-08-30 发布于安徽
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双启动子对重组溶源性枯草杆菌中外源蛋白表达增强作用.pdf

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卷期生物工程学报 !! ! %’ (!! ) (! 年月 !# $ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+,-. !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 双启动子对重组溶源性枯草杆菌中外源蛋白表达的增强作用 !#$ %’(’)*+ ,-.#-/* 0*)*’$’1’+ ,-23(* %’4/)5’- 6’( 7#/)*5#$ %.#1* 7#+*4 8*/’(95-#-) !#$%%’ ’()$%$’ 刘刚，张燕，邢苗， MNO P+@A QR;)P S+@ +@3 TN)P *1+ 深圳市微生物基因工程重点实验室，深圳大学生命科学学院，深圳 :UD# ，，，， 3%$4%$ 5%2 6+7(*+/(*2 (- 8#0*(7#+, 9%$%/#0 :$1#$%%*#$1 !(,,%1% (- 6#- % 30#%$0% 3%$4%$ ;$#%*#/2 3%$4%$ :UD# !#$+ 摘要探讨了双启动子对基于溶源性噬菌体构建的重组枯草杆菌中外源蛋白表达的影响。分别将不含或含有本身启动子的 E淀粉酶基因（来源于.+0#,,) +=2,(,#)%- +0#%$ ）和青霉素酰化酶基因（来源于.+0#,,) =%1+/%*#)= ）克隆到溶源性枯草杆菌中，得 ! 到重组菌，，以及。由于同源重组，所克隆的片段整合到溶源性枯 . ( )7/#,# ;*SU . ( )7/#,# ;*S! . ( )7/#,# V;U . ( )7/#,# V;! 草杆菌中的噬菌体基因组上，并处于噬菌体强启动子的下游。在重组菌;*SU 和V;U 中，在热诱导的情况下外源基因的转录只受到噬菌体启动子的作用，而在重组菌;*S! 和V;! 中，在热诱导下外源基因的转录同时受到噬菌体启动子和基因本身所带启动子的作用。双启动子的应用使重组 E淀粉酶的表达量提高了U$$W ，使重组青霉素酰化酶的表达量提高了UU$W 。 ! 关键词淀粉酶，解淀粉芽孢杆菌，巨大芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，双启动子，青霉素酰化酶 E ! 中图分类号文献标识码文章编号（） X=D ; UE$#U !# !EU9UE= :9+)#/) C.0 0YY0-6 Y 3B+’ 5,760,? @ ,0-781@+@6 5,601@ 5,3B-61@ Y,7 8+-60,1+’ 5.+A0 8+?03 .+0#,,) )7/#,# 0H5,0??1@ （）（） ?Z?607 [+? 1@20?61A+603 ( ;’5.+ +7Z’+?0 Y,7 .+0#,,) +=2,(,#)%- +0#%$ +@3 50@1-1’’1@ +-Z’+?0 Y,7 .+0#,,) =%1+/%*#)= [0,0 ?0’0-603 +? 6.0 1@31-+61@A 0@JZ70? ( \6. 6.0 5,760,’0?? A0@0? +@3 6.0 5,760,E80+,1@A A0@0? [0,0 1?’+603 6.,BA. V/ +75’1Y1-+61@ [16. 5,50,’Z 30